主题：【资料】高效液相色谱仪的维护与保养

高效液相色谱仪的维护与保养
）输液泵的维护
1）试验室常用备件包括垫圈、0环、接头、凸轮、泵头、止回阀和连接件等。活塞和弹簧等不常换。
2）腐蚀性溶剂或缓冲液在泵内存放不可过夜，否则溶剂会对泵起腐蚀作用。使用腐蚀性物质后要冲洗，先用水后用甲醇。
3）每次更换溶剂都要有记录，若要搁置一段时间，则要记录最后一次所用的溶剂是什么。
　　4）避免电机过热，带电机的泵要定期加油。
　　5）不要使用挥发性很大的溶剂戊烷、乙醚），。这类溶剂在运行过程中易挥发而使系统产生气流泡。流动相在使用前要脱气，以免产生气泡。
　　6）经常检查压力限制开关，检查流速。
　　（2）输液泵常见故障及排除方法：
　　1）既无压力指示，又无液体流过，可能是泵密封垫圈磨损，需更换，或有大量气泡进入泵体形成空穴，可泵工作的同时，用一个50ml的玻璃针筒在泵出口处抽气泡。
　　2）压力波动大，流量不稳定，系统中有空气或单向阀浸入盛有丙酮的烧杯内，用超声波清洗。
　　3）压力异常升高输液管被堵塞，如泵垫圈磨耗产生的细屑和缓冲液析出的盐等。多数在细径的管道和经过滤器处发生堵塞，需及时清除异物并彻底洗净。对流路系统中溶剂的置换，应以相混溶的溶剂逐步过渡，例如采取以下方式：缓冲溶液→←蒸馏水→←极性有机溶剂→←有机溶剂。
　　4）压力降低：系统有泄漏，如进样阀的接头由于反复拆装使不锈钢垫圈出现刻痕，以致漏液。故凡有接头螺帽处均以拧至不漏液为度，不宜过分拧紧，以免损坏接合处的密封。
　　（3）进样阀的维护：进行阀注射孔的导管内端是一个聚四氟乙烯材料做的钵形垫圈（或平垫圈），作用是保证样品液全部注入系统而不外汇。导管不宜审批权得太紧，否则垫圈被挤压过度而封死，无法进样。
　　进样阀的通道十分微细，稍有脏物即易堵塞，所以，样品预先处理很重要。样品一定要溶解完全，同时避免注射浓深夜，以免残留液在进样阀内析出结晶引起堵塞，使系统压力异常上升。
　　（4）色谱柱日常维护：
　　1）每次开机时，流速和柱压要逐渐加强，突增压会使柱庆受到冲击引起紊乱，产生空隙，使柱头凹陷。
　　2）在注射样品前要使色谱系统平衡。
　　得不严重，可用皮肤是否有冷感加以判断。空气会从漏缝进入系统，引起基线漂移，影响峰高和峰面积的重复性。
　　4）不要把柱头拧得太紧，过紧易损坏接头螺纹引起渗漏。拧螺丝时使用的搬手应短些，不宜太长。
　　5）不要把柱子放在有气流的地方或直接放在阳光下，气流和阳光都会使柱子产生温度梯度，造成基线漂移。若怀疑基线漂移是由温度梯度造成的，可设法使柱子绝热，例如用恒温炉或恒湿水套使之恒温，也可用布或毛巾把柱子和接头包起来。
　　6）若仪器用来作常规分析，可配制一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
　　7）若所注样品会污染柱子，可用适当的溶剂（几百毫升）慢慢冲柱子过夜。使用再用流动相重新平衡柱子30分钟。
　　8）装卸、更换、贮存需挪动柱子时，动作宜轻，不使其受到碰撞，以免柱床因震动而产生空隙或通道。
　　9）使用硅胶为基底的柱子，流动相的pH值一般不应＞8或＜2，pH＞8会使硅胶骨架溶解；pH＜2则键合相化学键易剥离。
　　（10）色谱柱在使用过程 中，柱压逐步升高，可能有两个原因：①柱子被污染或有固体析出造成流路堵塞，②固定相颗粒被碎或骨架被溶解。解决的办法：①在分析柱前加一根短保洗柱（内径4×50mm），里面的填料应与分析柱相同；②避免使用碱性强的流动相；③如果柱头部分被污染，可将柱头部分变色的固定相刮去，另加一些新的作为补充。
　　11）柱要加标签，新旧分开，不要放大温差大的地方。
　　（5）检测器的维护：
　　常见故障如下：
　　1）异常峰和噪音如图10-1所示，对于①、②的异常峰和方形峰以及④的噪声异常增大现象，表示光源灯已到极限，应更换并检查上述现象是否消失。若流动相被污染，也会出现①和②的情况。流动相内混有气泡可出现⑤的现象，气泡去除方法：一面由泵送液。一面用手指紧压流动池出口的连接管，使池内增压，如此反复3~4次，气泡即可冲走。注意不应使流动池压力增加太多，以免破裂。流动池漏液或池出口反压过大，环境温度起落大（如直接有风吹在示差折光检测器上），都可能发生⑥的现象。若流动池出口反压太大，可检查流路是事畅通，或更换内径粗一些的出口连接管。
图10-1 异常峰与噪音图
（1）异常峰（2）（3）方形峰（4）噪声电平异常增大（5）流动池内有气泡
（6）流动池漏液，池出口反压过大及温差大
　　2）基线漂移：样品池、参比池被污染，可用溶剂清洗检测池，但所用溶液和原来使用的流动相互溶，或采用溶剂过度的方式。若池子太脏，可用10%HNO3和蒸馏水清洗。另外，色谱柱污染，不断有杂质从柱上洗下，也会引起检测器讯号的噪音和漂移。环境温度变化也会引起漂移。
　　3）紫外吸收响应值改变，同一个样品混合物用不同厂家生产的紫外吸收器测定，可得到不同的响应值。这是由于检测器的紫外吸收波长不一样，使每个组份的摩尔吸收度有变化，讯号响应值也发生了变化；有时，即使两个检测器的紫外吸收波长均为254nm，但由于灯源的波长带特性不一样，也会出现不同讯号响应值；改变紫外检测器灵敏度和流动池结构，也会导致组份响应值勤的增加或减小。
　　4）紫外吸收响应值出现负峰在测定稀溶液中的痕量组成分时，样品的紫外吸收值低于流动相的相应值而出现负峰，此时应特别注意剂的纯度。