主题：【第七届原创】关于液相色谱方法优化的一点看法

原文由 宫昭(v2651348) 发表:
对于化药的有关物质、痕量检测，一直认为用紫外检测（一个波长）、蒸发光、示差不是很好，毕竟有些物质在所定的条件下是看不到的。

原文由 happy王子矜(wangzijin) 发表:
把在原来帖子那个地方的回复贴过来，占楼主个地方，下面的内容都是对原来帖子的意见，跟现在的楼主无关。

1第一条前半句问题不大，后半句不能说不对，有些情况下也是可以出现的，但是一般填料种类接近，性能靠谱的色谱柱间，峰高和峰面积差别不大。除非峰型已经基本不能看，否则不太会有通过更换色谱柱来改变灵敏度的情况。

2波长与分离度的关系描述并不正确，楼主的图也不能反应啥问题。只能说峰响应越大，可能造成的峰重合越多，体现出来就是分离度数据不好。

这里错误有两点，第一，不一定波长越低，吸收越好，只能说很多化合物（苯环类在260~190之间的比较多，但是也有个吸收的山峰谷底）在某些波段会这样，如果是硝基苯之类的，可能260以上某些波长的吸收比低波长更好，楼主说的这个现象就反过来了

第二，波长应该是在流动相体系之前确定的事情，所以说，通过改变波长来修正某方法里面的分离度什么的，是非常不靠谱的行为。楼主的观点即使正确，也没啥实际用处.

3一般情况下是这样，不过有例外情况。增加流动相极性不一定会起到加大分离度。增加流动相极性，一般来说会增加所有峰的保留时间，但是每个峰增加的程度不一定一样，所以说，两个峰越走越近也是有可能的。

4流速对分离度的增加减小影响不大，其他情况下搞不定的时候会试试看，不过也是个微调的作用。至于灵敏度，不应该在关心范围之内。。。

以上都是针对反相C18类色谱柱和紫外或DAD类检测器，其他条件下会有另外的变化，一句两句就说不清了，也没有什么普遍规律。

个人观点，有不对的欢迎交流，不过我可能回复比较慢最近比较忙，见谅。

原文由 sharplake!(lakelakelake) 发表:
填料更细的柱子对应的流速也要变小吗

原文由 宫昭(v2651348) 发表:
对于化药的有关物质、痕量检测，一直认为用紫外检测（一个波长）、蒸发光、示差不是很好，毕竟有些物质在所定的条件下是看不到的。

原文由 冰块(burningsnow) 发表:

原文由 happy王子矜(wangzijin) 发表:
回楼上，并不少见。你说的理论适合于纯水流动相。缓冲盐体系下我筛选条件见过几次这样的事情，比如测的酸和其他化合物，然后流动相里面加了酸。这样的情况下，AB峰的位置可能变成BA峰。那么他们期间肯定有重叠的时候。

这种情况下起主导作用的应该是pH值吧，在不同pH下样品的解离程度不同而表现出的极性和保留性质不同，我在做混合维生素分析的时候遇到过一次比较明显的峰位反转。

原文由 我是风儿(nphfm2009) 发表:
个人认为在实际方法开发时，这些理论应用的不多