主题：【第七届原创】方法不同效果不同，方法决定效果

方法不同效果不同，方法决定效果

    同一样品检测方法很多，不同方法，效果一般也不一样，有的甚至相差很大。下面我们就用两种高效液相色谱方法检测下滋补佳品蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖。

方法一 

样品溶液制备

    标准品溶液制备：分别精密称取果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖各0.1g于100ml容量瓶中，加50ml水使之充分溶解，加乙腈至刻度，摇匀，备用。

    样品溶液制备：精密称取0.5g样品于100ml容量瓶中，加50ml水使之完全溶解，加乙腈至刻度，摇匀，0.45um有机相微膜过滤后，待测。

色谱条件

检测器：示差折光检测器

色谱柱：氨基柱（5um，4.6 X 250mm）

流动相：乙腈：水=65：35（V:V）

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

检测池温度：40℃

进样量：20ul

标准品色谱图：

样品色谱图：

方法二

样品溶液制备

    标准品溶液制备：分别精密称取果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖各0.1g于100ml容量瓶中，加适量水使之充分溶解并定容至刻度，摇匀，备用。

    样品溶液制备：精密称取0.5g样品于100ml容量瓶中，加适量水使之完全溶解并定容至刻度，摇匀，0.45um水相微膜过滤后，待测。

色谱条件

检测器：示差折光检测器

色谱柱：糖柱（树脂填料，8um，10 X 300mm）

流动相：纯水

流速：1.0ml/min

柱温：60℃

检测池温度：40℃

进样量：20ul

标准品色谱图：

样品色谱图：

    两种方法不同，检测效果相差很大，下面就一一解读。

    首先说实验费用：氨基柱便宜于糖柱，一般不到糖柱40%价格，而流动相方法一中乙腈+水要远远贵于方法二中的纯水。另外氨基柱的使用条件没有糖柱那么苛刻，使用寿命也比糖柱长。整体来说采用方法一实验费用更低（一般情况下）。

    结果准确性：氨基柱分离度好，实验结果更准确，并且可以通过调整流速、流动相中两相比例、柱温等来控制检测时间及分离度等指标。糖柱分离度及分析时间只和流速关系较大，因此分离度如果不理想，调整色谱条件单一，效果一般相对不理想，检测结果相对不准确。

    检测时间：氨基柱分离速度慢，检测时间长，糖柱却要快一些。

    灵敏度：采用糖柱检测灵敏度要高一些，尤其是果糖、葡萄糖等。糖柱还有一个优点那就是相同浓度的样品色谱峰高、峰面积也较接近。

    实验繁琐程度：使用糖柱时流速、柱温等条件一般要缓慢变化，不允许突变，色谱柱耐压也不高，一般就5MPa左右。使用氨基柱没这么繁琐，耐压一般也能达到20MPa。

    总之采用以上两种方法都可用于检测蜂蜜及其它食品、保健品等中的糖类物质，但优缺点不同，检测效果相差很大。我们实验时要根据实验需要选择合适的方法，力争花最小的代价实现效益最大化。