快速导航采购仪器提醒

液相色谱（LC）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

返回列表

主题：【已应助】色谱峰拖尾，求指点

浏览0 回复9 电梯直达

dywzqbx

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2015/01/17 15:11:25 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱条件：

Column: Agilent zobax, C18(150*4.6, 5um)

Column Temperature: 50 °C

Detector temperature（RI）: 50 °C

Buffer: pH 2.50 ± 0.05 phosphate buffer

Accurately weigh 4.6 g of NH₄H₂PO₄ into 1L of water and adjust pH to 2.50 with HPLC grade phosphoric acid.

Mobile phase: Buffer:MeOH= 55 :45, V/V, premix. flow rate: 1.5ml/min

Injection Volume：50 uL

WKS concentration: 0.28mg/ml

色谱结果：

结果分析：

样品为盐酸盐类，0.28mg/ml 时pH为5.8。采用Zorbax Eclipse plus-C18色谱柱也没有改善。拖尾因子为2.85。

当样品浓度为0.028mg/ml时，Tailing为1.17。

但是现在需要将样品浓度做到0.28mg/ml。如何方能解决拖尾问题，请各位指教。

该帖子作者被版主 zhaohua8011加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励

0
赞贴
9
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价

选参数看心得找厂商查方案

专属顾问快速对接

立即提交

可能感兴趣

houjjun

禁止发帖修改昵称

ID：houjjun

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/17 17:06:19 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可能是色谱柱问题

赞贴

拍砖

hnteng

禁止发帖修改昵称

ID：hnteng

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/18 23:32:08 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不知楼主测的什么物质？
　
　　从你的色谱条件中，我感觉有几点不太合常规：
　
　１　柱温过高。通常我们很少设到５０度的。大多是在２５度到４０度之间。就我个人而言，我一般不会超过３５度。
　２　流速不合适。4.6mm的常规柱子，最佳流速是1.0ml/min。不要总是去调流速。对液相而言，最能影响保留行为是的流动相，而不是柱温和流速。我们做液相，流速是一般就是固定在1.0ml/min不变的。除了在流动相上大做文章外，也就偶尔改改柱温。
　３　流动相太复杂。我不知你的样品是否在用某文件规定的标准方法做还是自己开发方法？如果是自己开发，一定要搞缓冲盐。我用缓冲盐，通常会选醋酸盐（物质吸收在230nm以上），只有万不得已才会用磷酸盐。
　你的样品可能是碱性的。我觉得可以试试加千分之一的三乙胺。

该帖子作者被版主 zhaohua8011加 3积分， 2经验，加分理由：积极应助

赞贴

拍砖

zhaohua8011

禁止发帖修改昵称

ID：zhaohua8011

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/19 12:27:12 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有点色谱柱过载，进样量太大！

赞贴

拍砖

浪淘沙隐

禁止发帖修改昵称

ID：zhoujin83

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/19 13:06:07 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

感觉可以综合考虑2楼3楼的意见。从容易的开始吧，把样品浓度提高并减少进样量，如果不行再换色谱参数，如2楼所说。

赞贴

拍砖

夏天的雪

禁止发帖修改昵称

ID：bingwang228

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/19 13:08:29 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

减小进样量，样品可以稀释后进样

赞贴

拍砖

dywzqbx

禁止发帖修改昵称

ID：dywzqbx

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2015/1/19 14:01:31 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hnteng(hnteng) 发表:
不知楼主测的什么物质？
　
　　从你的色谱条件中，我感觉有几点不太合常规：
　
　１　柱温过高。通常我们很少设到５０度的。大多是在２５度到４０度之间。就我个人而言，我一般不会超过３５度。
　２　流速不合适。4.6mm的常规柱子，最佳流速是1.0ml/min。不要总是去调流速。对液相而言，最能影响保留行为是的流动相，而不是柱温和流速。我们做液相，流速是一般就是固定在1.0ml/min不变的。除了在流动相上大做文章外，也就偶尔改改柱温。
　３　流动相太复杂。我不知你的样品是否在用某文件规定的标准方法做还是自己开发方法？如果是自己开发，一定要搞缓冲盐。我用缓冲盐，通常会选醋酸盐（物质吸收在230nm以上），只有万不得已才会用磷酸盐。
　你的样品可能是碱性的。我觉得可以试试加千分之一的三乙胺。

谢谢你的回答：

1 柱温，检测器为RI，标准中给的温度为50，可以考虑降到40，柱温与检测器温度需要保持一致。

2 流速：对于4.6 mm色谱柱的最佳流速为1我是知道的，只是这是上面给下的方法，我只能先按照他的方法做，再一点点的改动。

3 流动相：有机相加pH为2.5Buffer，到时不觉得有多复杂，磷酸盐对峰形改善效果应该会更好点吧，至于紫外吸收，我用的是RI（示差折光检测器），这方面不会有影响的。

样品为盐酸盐，pH为5.8，为何你会觉得是碱性？

赞贴

拍砖