主题:【讨论】梯度变化对柱子的影响

浏览0 回复13 电梯直达
m2989798
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大家好,我每次清洗反相柱子1-30分钟甲醇:水=15%:85%,30.1-60分钟为50%:50%,60.1-90分钟为85%:15%,这样子给一个过度时间,不会对泵损伤太大,不知道合适不,我的系统是有缓冲盐的,如果没有缓冲盐能直接用水洗吗
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对于冲柱子,含有缓冲盐,建议用大比例的水长时间冲洗,最后用大比例有机相(如90%~100%甲醇)保存,这个冲洗时间可以缩短。
对于不含缓冲盐的流动相,可将大比例的水冲洗时间缩短
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一片枫叶
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缓冲盐不太严重的情况下,没有必要清洗太长时间,特别是甲醇:水=1:1时系统压力会增高,对系统和色谱柱多少不利,水冲色谱柱容易造成键合相流失。
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m2989798
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“原文由一片枫叶发表:缓冲盐不太严重的情况下,没有必要清洗太长时间,特别是甲醇:水=1:1时系统压力会增高,对系统和色谱柱多少不利,水冲色谱柱容易造成键合相流失。”
那么一般多久合适呢,我感觉我把时间拉的这么长主要是因为想在中间弄个过度的时间,你看这个需要吗
一片枫叶
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原文由 m2989798(m2989798) 发表:
那么一般多久合适呢,我感觉我把时间拉的这么长主要是因为想在中间弄个过度的时间,你看这个需要吗
根据系统的使用情况,如果是正常使用,清洗时间可以适当缩短,没有时间国定之说。
robin_clhx
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不清楚楼主的缓冲盐的浓度
如果是含有缓冲盐的流动相,刚开始冲洗时,水相可以加大到90%,按柱体积的20倍冲洗,然后再逐级换成有机相比例高(大于70%)的流动相保存柱子
不过用到缓冲盐的柱子,一般不可以用很长时间的了,即使是平常注意冲洗和保养,柱效液会慢慢下降的
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夏天的雪
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用到缓冲盐时可以适当延长第一步的时间,然后用大比例或者纯有机溶剂冲洗并保存,个人感觉中间不需要这么漫长的过渡,直接过渡就可以了
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夏天的雪
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系统可以用纯水冲洗,但是需要将色谱柱卸下来后再冲,一般色谱柱都不能耐纯水
夏天的雪
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原文由 m2989798(m2989798) 发表:
那么一般多久合适呢,我感觉我把时间拉的这么长主要是因为想在中间弄个过度的时间,你看这个需要吗
第一步时间可以长一些,想要过渡可以设置5~10min,直接从初始流动相变为纯有机相
zhaohua8011
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m2989798
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想问下大家,多久不用的话就要用有机溶剂冲洗密封了,我还听有人说要把他泡在有机溶剂中,是这样吗
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