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主题：【已应助】液相色谱柱可以用甲酸冲洗吗？

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tozan
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发表于：2015/06/08 23:06:10 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小弟最近在做食品项目的开发，不小心把一些怀疑是蛋白质的杂质冲进色谱柱了，峰型变差好多。有同事建议用0.1%甲酸水（pH≈3）冲洗后再用乙腈冲洗。小弟不敢贸然采纳，想请求各位大侠意见：
1、一般xdb C18色谱柱使用pH范围在2~8，pH=3时柱流失会不会很大？
2、蛋白质应该使用什么溶剂冲洗？我的猜想是用较高比例的水：乙腈，50℃冲洗，后再用纯乙腈冲洗。不知是否可行
推荐答案：浪淘沙隐回复于2015/06/09
不同的蛋白石不是有不同的等电点吗？流动相应该要在远离等电点的pH范围内吧，不然蛋白石析出来堵塞色谱柱就麻烦了。
另外C18色谱柱使用pH3的流动相完全没问题的，就是使用0.1%的甲酸（pH估计不超过2）也是没什么问题的。
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2015/6/9 8:38:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不同的蛋白石不是有不同的等电点吗？流动相应该要在远离等电点的pH范围内吧，不然蛋白石析出来堵塞色谱柱就麻烦了。
另外C18色谱柱使用pH3的流动相完全没问题的，就是使用0.1%的甲酸（pH估计不超过2）也是没什么问题的。
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2015/6/9 8:46:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
pH在3时在色谱柱的耐受范围内，可以进行冲洗，冲洗之前可以测定一下0.1%的甲酸的pH
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hujiangtao
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2015/6/9 8:47:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
质谱上一般都要求进0.1%甲酸的
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2015/6/9 9:14:29 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
0.1%甲酸可以，就是不一定有效果
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tozan
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2015/6/9 9:21:05 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
不同的蛋白石不是有不同的等电点吗？流动相应该要在远离等电点的pH范围内吧，不然蛋白石析出来堵塞色谱柱就麻烦了。
另外C18色谱柱使用pH3的流动相完全没问题的，就是使用0.1%的甲酸（pH估计不超过2）也是没什么问题的。
之前没有考虑到等电点问题，学到了
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tozan
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2015/6/9 9:21:33 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢各位大侠。
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