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液相色谱（LC）

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仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

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主题：关于冲洗色谱柱

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bibibird

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发表于：2006/10/11 23:06:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

每次用色谱柱之前，先用有机相看一下柱子的压力，用完后，用纯水冲洗很长一段时间后，接着，再用有机相冲洗，出现过以下几种情况：
1 压力回到原来的数值，但是下次用的时候，压力还是比较高
2 压力一直冲不下，而且还越冲越高
（所用的流动相都是现用现配的，应该不会出现问题，柱子是一根新柱子）
请问，高手，这大概是些什么原因？万份感激！！

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2006/10/11 23:12:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请教：
为什么每次测量结束后都要用蒸馏水冲洗后再使用流动相重复再冲洗呢？

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小左

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2006/10/12 10:42:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

1拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。

3将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，(此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动性)。这时，如果柱压仍不下降，再检查；

4更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

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qingzi

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2006/10/12 10:43:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

是用缓冲溶液做的流动相吗？否则，不能用纯水长时间冲。

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小左

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2006/10/12 10:44:00 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 anping 发表:
请教：
为什么每次测量结束后都要用蒸馏水冲洗后再使用流动相重复再冲洗呢？

柱子最好保存在有机溶剂中,也许这是使用后用流动相冲的原因吧

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cherry39

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2006/10/12 18:55:00 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 zyh123002 发表:
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

1拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。

3将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，(此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动性)。这时，如果柱压仍不下降，再检查；

4更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

说的很有道理！赞！

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wbj6586

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2006/10/13 8:58:00 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

说的很有道理！赞！

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小左

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2006/10/13 10:15:00 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wbj6586 发表:
说的很有道理！赞！

过奖了,我也是从别处看到的,大家互相交流,呵呵

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zhs198069

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2006/10/13 14:44:00 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主为什么要用纯水冲洗呢？有些柱子是不能用100%谁来冲的

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lilyhfl

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2006/10/14 0:22:00 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我补充几点：
1：柱压过高时检测的基本原理就是顺着路线走向检查各个“路口”，包括从流动相走出的通路，三通，两通都要检查，因为如果曾经使用过缓冲溶液和盐做流动相，没有维护好的话，会对各个通路造成影响，极有可能腐蚀有些零件中的小附件，比如一些垫片，需要及时更换；
2：检测柱子的话，有些朋友都回答了很多了，我就补充一点，如果发现是预柱堵的话，可以用超声（加纯乙醇，甲醇）一段时间，可以恢复
至于能不能用纯水冲洗，应该由柱子决定，影响柱压的最基本因素就是流动相的粘度，纯物质的粘度最低，但是一般不建议用纯水常时间冲洗，用高浓度有机相较好。柱子使用完毕也应该按照说明书的用纯溶剂保存。
3：如果确定柱子没有问题，是系统的问题，就需要用纯水常时间冲洗一下系统
4：柱子和系统都没有问题的话，就是检测器的问题，很有可能是检测池堵了，尝试一下不接柱子，光连检测器看看，就会发现了。如果是检测池堵了，那按照你检测池的说明，一个一个零件卸下来，有顺序的，而且要非常小心，一个不小心，你就装不回去了。把可以清洗的部件超声一下。有些象石英之类的是不能超声的！
5：最后也是最惨的，就是你的检测器坏了，或者到了使用的寿命了，也会出现莫明其妙的不正常柱压！
不知道我补充的对不对，是我自己的一点经验，有不对的地方，希望大家指正！