分析方法的转换2015-10-14 实验室Map
导语
在实际工作中,我们经常会遇到方法之间的转换,从HPLC方法转换到UPLC方法,从长柱转换到短柱,其中遇到最多的是梯度方法,那么流动,梯度参数该如何调整呢?
在开始之前,先了解一个描述梯度能力的公式:
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Gs:梯度陡度,
F:流速(mg/l),
ΔΦ:溶剂变化比例(5%-95% B,那么值就是90 )
tG:梯度时间(min)
Vm:柱体积(扣除了调料占据的空间)
其中
Vm的计算公式如下:![]()
r:柱子半径(cm)
L:柱子长度(cm)
W:(fully porous materials) ≈ 68% (0.68), and W (core-shell particles) ≈ 55% (0.55)
例如一个方法柱子为:150 mm × 4.6 mm , 5-μm,流速为1ml/min,梯度时间为30min。变化比例是20-60% B
Vm = π *0.232*15 *0.68 = 1.7 mLGs = 1.7 *40/1 *30
在方法转换的时候,就是保持
Gs 不变,下面是一个杀虫剂分析的方法
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Figure 1: (a)F=1,tG=30 , ΔΦ = 40 b)F = 2 and tG = 15 (Gs constant). c) F = 2 and ΔΦ = 80 (Gs constant). (d) Vm = 0.19, ΔΦ = 60, F = 0.5 mL/min, tG = 10 min (Gs constant). |