作者 微信ID:Lab_Map
2015-10-21 导语
方法开发时,我们都曾面临这样的一个问题:是选择反相柱还是正相柱?或者是离子色谱柱?另外柱子的长度,颗粒的大小又该是多少呢?在此分享一些tips
1查阅文献绝大部分的化合物都能在文献或者是相关期刊上查到测试方法,甚至在仪器厂商的官网或论坛里也能可能查到你想要的东西。
如果查不到,即使查到结构相近的化合物的测试方法,也可以通过去优化调整达到你想要的。
2了解物质的疏水性如果查不到,那么只能从零开始了,首先要了解化合物的疏水性,公式1描述了如何计算化合物的疏水性,log P大于0,说明物质是疏水的;log P小于0,说明物质是亲水的
3了解柱子的作用原理不仅要了解物质的疏水性,还要了解物质是如何与柱子发生作用而达到分离,从而去选择是正想还是反省,又或者是HILIC等
物质与柱子的固定相相互作用,大概有四种模式:
〈1〉色散力( Dispersive)
非极性分子相互靠拢时,它们的瞬时偶极矩之间会产生很弱的吸引力,这种吸引力称为色散力。
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由于分子中电子和原子核不停地运动,非极性分子的电子云的分布呈现有涨有落的状态,从而使它与原子核之间出现瞬时相对位移,产生了瞬时偶极,分子也因而发生变形。分子中电子数愈多、原子数愈多、原子半径愈大,分子愈易变形。瞬时偶极可使其相邻的另一非极性分子产生瞬时诱导偶极,且两个瞬时偶极总采取异极相邻状态,这种随时产生的分子瞬时偶极间的作用力为色散力(因其作用能表达式与光的色散公式相似而得名)。虽然瞬时偶极存在暂短,但异极相邻状态却此起彼伏,不断重复,因此分子间始终存在着色散力。无疑,色散力不仅存在于非极性分子间,也存在于极性分子间以及极性与非极性分子间。
〈2〉取向力( dipole-dipole)
极性分子与极性分子之间的固有偶极与固有偶极之间的静电引力称为取向力,又叫定向力。因为两个极性分子相互接近时,同极相斥,异极相吸,使分子发生相对转动,极性分子按一定方向排列,并由静电引力互相吸引。当分子之间接近到一定距离后,排斥和吸引达到相对平衡,从而使体系能量达到最小值。
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〈3〉氢键( Hydrogen bonding)
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〈4〉离子交换( Ion exchange)
分析物的电荷与固定相表面的电荷不一致,从而通过吸附达到分离的目的
4选择柱子固定相的键合相虽然绝大部分柱子是硅氧化结构,而键合相的不同,还是有很多柱子可以选择的
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5柱子的基本参数柱效与分离度成正比
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其中柱子内径的改变,不仅需要调整流速还会影进样体积
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另外填料的大小可以显著的改变柱效,但也要考虑系统的压力