原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:加标溶液都是很微量的100uL,提取溶液大部分是水溶液,不会破坏抗体,其实您的答案很接近了,乙酸乙酯在220nm下有吸收,后来实验证明吸收还挺大的,谱图中那个呕吐毒素的大峰其实就是乙酸乙酯的峰,由于乙酸乙酯的峰很大,呕吐毒素的峰很小,客户把乙酸乙酯的峰误认为是呕吐毒素了。标准品初始浓度:200ug/mL(200ppm)的浓度稀释到1ppm,其中乙酸乙酯的浓度会达到3000-4000ppm;这样子标准品进样的时候会在液相色谱有一个很大的吸收,后来客户用乙酸乙酯进样验证确实是乙酸乙酯的峰。
看了几个测定呕吐毒素的标准,检测波长都在220nm,此波长检测呕吐毒素应该是没有问题的;标准品中用到了乙酸乙酯,乙酸乙酯的吸收截止波长在256nm,在低波长可能会有吸收,但是看别人的讨论该物质会在C18柱上会有拖尾,但是色谱图中的色谱峰还是可以的。标样溶液中含有乙酸乙酯和甲醇,会不会免疫亲和柱在上标样的过程中标液中的溶剂破坏了抗体,导致上样时抗原无法与抗原结合
原文由 乐知者(v2900665) 发表:呕吐毒素的峰在4.17min处,根据呕吐毒素的化学结构,共轭体系不强,只有一个碳碳双键和羰基共轭,这样子在220nm下吸收不强,相对乙酸乙酯的峰来说,峰型很小
加标溶液都是很微量的100uL,提取溶液大部分是水溶液,不会破坏抗体,其实您的答案很接近了,乙酸乙酯在220nm下有吸收,后来实验证明吸收还挺大的,谱图中那个呕吐毒素的大峰其实就是乙酸乙酯的峰,由于乙酸乙酯的峰很大,呕吐毒素的峰很小,客户把乙酸乙酯的峰误认为是呕吐毒素了。标准品初始浓度:200ug/mL(200ppm)的浓度稀释到1ppm,其中乙酸乙酯的浓度会达到3000-4000ppm;这样子标准品进样的时候会在液相色谱有一个很大的吸收,后来客户用乙酸乙酯进样验证确实是乙酸乙酯的峰。