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液相色谱（LC）

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主题：【求助】液相色谱问题

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zli000

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发表于：2016/01/09 12:57:31 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位大神，实在木有办法，对这一片太不熟悉了，能帮我看看这道题吗？一台高效液相色谱进样环为20ul，做定量分析，一次进样为26ul，另一次进样为18ul，这两次进样对分析结果分别有什么影响

该帖子作者被版主武灵加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖求助

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2016/1/9 14:49:49 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

定量环是20微升最大进样量就20微升，

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yishengweiyao

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2016/1/9 15:31:59 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

超量进样，最大量也只能进20ul,进18ul如果是移动进样器应该就是18ul，手动进样应该≤18ul

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支点

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2016/1/10 14:46:31 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实际是第一次进样20微升，一次进样18微升；若再考虑样品扩散问题，这两个体积都不是很准。外标法肯定会考虑进样体积的。如果是归一化和内标法就没有什么影响。

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zhangkecai

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2016/1/11 9:20:17 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看你计算用什么方法。外标法肯定不准，内标法影响不大，面积归一法影响也不大的。

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夏天的雪

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2016/1/11 13:02:26 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

第一种情况应该是满环进样，但是根据您的定量环的体积，实际进样量只有20ul；第二种进样为部分装填法进样，但是由于样品扩散等影响，对结果的重复性也可能会产生一些影响。如果您要依据这两种进样情况外标法定量应该也是可以的，只是第一种进样的实际进样体积为20ul。另外，定量时需要标样和样品的体积一致。

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zli000

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2016/1/13 19:42:47 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228)发表:第一种情况应该是满环进样，但是根据您的定量环的体积，实际进样量只有20ul；第二种进样为部分装填法进样，但是由于样品扩散等影响，对结果的重复性也可能会产生一些影响。如果您要依据这两种进样情况外标法定量应该也是可以的，只是第一种进样的实际进样体积为20ul。另外，定量时需要标样和样品的体积一致。

我看老师的课件上说是若采用部分进样，进样体积不能超过定量环体积的一半，否则会部分样品将会从出口流失。这是因为由于层流的关系，样品流经管中心的速度是平均速度的两倍，那那个进十八微升的计算时只能按10微升的算了是吗

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hnteng

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2016/1/25 23:36:16 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

　　这样的进样是都不准的。
　　满环进样，要满足定量环的3-5倍。也就是60-100ul。
　　部分进样，一般按说明书是不超过定量环的75%。也就是15ul。
　　所以：
　　　第一针进的20ul，并不是20ul。　
　　　第二针进的18ul，并不是18ul。
　　正确的做法是：
　　　要进20ul,　至少打60ul，这样就是准确的20ul。
　　　要进18ul，打不了。你最多进15ul，自己手把握准。最终准不准就看你的手了。一般定量分析我们极少用部分充满法。只有定性时，就随意打几ul。

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