主题:【讨论】谁有用CE或液质联用做长春瑞滨的啊?有的话近来讨论下吧

浏览0 回复17 电梯直达
nellieyxy
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该帖子已被luqinhua设置为精华;
最近我在做长春瑞滨,可是有很多问题还不知道,希望有在做的或者知道的朋友帮帮忙,我们一起探讨下,谢谢各位拉
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nellieyxy
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wanghf0821
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芝兰
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你现在遇到了什么问题呢?

“长春瑞滨”是一种新型抗肿瘤药。
nellieyxy
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首先我用CE做的时候很多问题都有,一,电流有时候稳定,有时上下波动幅度很大,要不就是急剧下降;二,重现性很差,出峰时间相差很大,三,经常会不出峰,进的同一个样品,重复做的时候但是相差很大;四,我选择以长春新碱作为参比背景,可是峰重叠太多,不好分离
另外我是新人,刚开始做CE,所以如果问题很白痴请大家原谅,谢谢了
nellieyxy
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nellieyxy
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即使不是长春瑞滨方面的,只要能提高CE重现性的都可以说的,谢谢拉
独角兽
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不了解这种东西。

关于电流、重现性等问题影响的因素太多,楼主最好把问题提的具体一点,这样大家也好根据具体情况分析。

关于楼主说的同一个样品重复做的时候相差很大,如果其他条件都相同的话,我觉得问题应该是出在buffer方面,楼主可以更换一下buffer或者调整ph等因素。

芝兰
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要提高重现性的话,有以下几点可以考虑:
1.每针最好更换缓冲液,且样品瓶的盖子须用新的。
2.如果是压力进样,压力应设置为最大压力。
3.毛细管两端的聚酰亚胺应烧掉,成为裸石英管,且切口平整,实验中若发现两端裸石英管有折断,则应重新切口,并烧制。
4.需除去样品和缓冲液中的气泡,最简单的方法是超声。
5.电泳时电流控制在50微安以下,并设置恒定的柱温,但注意不要高于室温太多,否则不利于散热,且易产生气泡。
6.如果管壁对样品的吸附不大,建议每针之间只需用缓冲液冲即可,而不需要用NaOH溶液冲洗。

另外,参比和样品分不开主要是你的缓冲液体系没选好,正如zhl2005兄所说,需更换缓冲液,或调整原缓冲液的pH值等。
芝兰
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原文由 nellieyxy 发表:
另外我是新人,刚开始做CE,所以如果问题很白痴请大家原谅,谢谢了

大家都是从新人开始的
芝兰
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重现性差和电流波动可能是气泡引起的,气泡可能来自样品或缓冲液,另一可能被忽视的主要来源是进样端裸石英管的切口不平整,因断裂或本身没切平。

不出峰可能根本没进到样。
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