主题:【分享】C4色谱柱使用说明书

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emmalee07
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1. 产品描述
填料组成:高纯度硅胶表面键合丁基

出厂溶剂:100%乙腈

所有色谱柱在出厂前都经过检测。检测条件、结果及批号请查阅《出厂检测报告》。
2. 使用前注意事项
1)出厂的色谱柱保存在100%乙腈溶剂中,使用前建议用100%乙腈的流动相低流速(建议0.5 ml/min)冲洗20-30倍柱体积;
2)为避免色谱柱的堵塞,所用样品和溶剂,包括缓冲液在内,都必须在使用前用0.45μm以上的滤膜过滤;
3)色谱柱用于梯度洗脱时,起始流动相通常为5%甲醇(或乙腈);
4)本色谱柱仅适用于反相模式。
3. 参考操作条件
规格(I.D.×Length)

4.6×150mm

 

4.6×100mm

4.6×250mm

10.0×250mm

 

21.2×250mm

 

21.2×150mm

柱流向 

按柱子标签上所注明的方向

pH范围 

2-8

压力范围

<200bar

<250bar

<100bar

温度范围 

0 - 50℃


4. 流动相
1)流动相对样品具有一定的溶解能力,不能与样品发生反应,并保证样品不会在色谱柱内析出或长时间留在色谱柱内,样品尽量使用和流动相相同的溶剂来溶解;
2)流动相缓冲液或盐类要保证现配现用,不能储存太久,避免流动相生成杂质微生物影响检测;
3)使用的流动相中含有缓冲液或盐类时,需用不含此类物质的水/有机溶剂过渡,并注意有机溶剂间的互溶性和盐的析出现象;
4)从水溶性溶剂到非水性溶剂都可以使用,但是反复置换极性极端不同的溶剂,可能会引起色谱柱的劣化;
5)纯水流动相可能会降低它的色谱性能,建议使用过程中水相比例不超过90%。
5. 维护与保养
1)为延长柱子使用寿命,建议使用保护住;
2)色谱柱使用后,一般保存在出厂溶剂中,请不要让缓冲液或盐类存留在色谱柱中。若长期不用时,用100%甲醇/乙腈作为保存溶剂,柱子两端堵头拧紧,以防止柱子干裂而损坏;
3)流动相中不含有缓冲液或盐类物质的情况下,提高组成洗脱液的有机溶剂浓度,有助于清洗柱内残留较大的物质,可以用100%的有机溶剂冲洗;
4)硅胶填料在pH值大于7的水相流动相中具有一定的溶解性,因此在pH值大于7的条件下使用硅胶色谱柱时,请在较低的温度(<40℃)条件下使用低浓度(0.01-0.02M)的缓冲液操作可获得较长的色谱柱寿命;
5)流动相含有缓冲液或盐类物质的情况下,先用不含此类物质的水/有机溶剂混合液(与流动相同等配比)置换掉色谱柱中的盐,再用有机溶剂冲洗20倍柱体积。在使用缓冲盐的情况下切忌直接切换到纯有机溶剂;
6)建议不要长期在极端条件下(如pH值的临界点、温度的临界点等)使用色谱柱,以避免色谱柱使用寿命变短。
该帖子作者被版主 武灵5积分, 2经验,加分理由:感谢分享
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原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
C4柱虽然使用较少,但楼主的分享值得欣赏!
做蛋白多肽
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没有用过C4色谱柱,这种色谱柱也是反相色谱柱应该和C18色谱柱的使用和维护原则相似
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