主题：液相色谱仪的故障排除

液相色谱仪的故障排除

                              封跃鹏  邱赫男
(国家环保总局标准样品研究所，北京，100029)
来源：«分析仪器 »
1    日常维护
1．1 泵
    泵是液相色谱仪的心脏，须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵，其基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能，应该保持泵系统的清洁。具体做法如下：
（1）要选择优质的容剂和试剂，在进入仪器前用0。45um膜过滤，并进行脱气处理。
（2）泵开始使用时，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。
（3）定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，并经常清洗进液处的微孔滤头。
（4）改变流动相时，应避免沉淀产生，以防止泵堵塞。
1．2  色谱柱
    色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气，在平时的工作中须注意以下事项：
（1）色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡；安装时，一定要保证阀件或管路的清洁。
（2）流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。
（3）在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理。
（4）分析结束语后，要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。
（5）如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭或定期给柱子补充合适的流动相。
1．3  检测器
对于紫外检测器，在分析柱平衡的差不多时，开启检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。
1．4  进样器
分析结束后，应反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。

2  常见故障的分析与排除
既使日常精心维护的液相色谱仪，随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下：
2．1  保留时间变化
保留时间的变化有三中情况：波动、缩短、延长。
保留时间出现波动时，应检查柱温是否处于恒温状态，如果设置为室温，气温的变化会引起保留时间的波动，应该设置为恒定温度；等度和梯度间还没有充分达到平衡状态时，应该用十倍以上柱体积的流动相去平衡色谱柱；缓冲液浓度太低时，应换用＞25mmol/L的缓冲液；色谱柱被污染或已经接近柱寿命时，应更换保护柱或换新色谱柱。 
保留时间缩短时，流速增加，应检查流速的设定；柱温高时，应检查柱的设置；进样量太大时，减少样品用量或降低样品浓度；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；流动相的PH值应保持3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。
    保留时间延长时，流速减小，应检查流速的设定和管路是否有泄露；柱温低时，检查柱温的设置；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；检查流动相的pH值是否3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。