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主题：【分享】新买的APS-C18色谱柱使用冲洗方法

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发表于：2018/03/01 15:51:41 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


一、新柱活化：新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换成流动相前，请使用过渡流动流动相平衡；

二、色谱柱保存溶液与评价报告一致。
三、在使用过程中如果流动相没有磷酸缓冲盐的存在，新柱子在使用之前需用100%的甲醇（色谱纯）以0.5~1.0的流速平衡30min左右，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。做完实验再用100%的纯甲醇（色谱纯）以0.5~1.0的流速冲洗30min左右，最后用100%的纯甲醇（色谱纯）保存。

四、在使用过程中如果流动相有磷酸缓冲盐的存在，新柱在使用之前需用10%的甲醇（色谱纯）水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min左右，将新柱高浓度甲醇溶液完全置换掉，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。做完实验再用10%的甲醇（色谱纯）水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min左右，将色谱柱中缓冲盐溶液完全置换掉，最后用100%的纯甲醇清洗色谱柱30min，最后用纯甲醇保存色谱柱。
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2018/3/1 16:16:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第三条，流动相中没有磷酸盐，貌似没有提到流动相的过渡，用甲醇冲洗后可以直接进流动相？
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2018/3/2 14:07:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相没有磷酸缓冲盐的存在，新柱子在使用之前需用100%的甲醇（色谱纯）以0.5~1.0的流速平衡30min左右，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。
APS-C18在做没有磷酸缓冲液的常规样品甲醇平衡过以后是可以直接进样的。
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