主题:【讨论】这是什么意思?

浏览0 回复11 电梯直达
智慧的弟弟
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梯度淋洗:流动相B70%→25min→流动相B20%    是什么意思?

样品测定的时候又该用哪种流动相?

以上是水中酚类物质测定--高效液相色谱法(水和废水监测分析方法,第四版)
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xj001978
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一般我们对高效液相设定主泵(通常为水)为A,从泵(通常为有机相)为B.你所问的应该是指对有机相和水的配比的梯度变化,你到编辑程序里可以进行梯度设定,首先设定时间25分钟,再设定流动相配比75%到25%,分步设定.其实意思就是刚开始你的流动相:水为75%:25%,通过你设定梯度变化经过25分钟变化为流动相:水为25%:75%,其中他们变化值和时间是成正比的.  不知道我的解释你是否理解.
xj001978
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把其中的75%和25%改成70%和20%就行了,开始有机相:水为70%:30%,经过25分钟,最后是有机相:水为20%:80%.
xj001978
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不好意思,按照你的色谱条件看,应该是指的水的梯度变化由70%到20%,其实意思和我之前说的一样,但有一点特别指出,你所配备的高效液相色谱仪是肯定有两个泵的,但老式的色谱仪只有一个泵,所以我们把流动相是按照有机相和水的一个固定比例配制的,那也就说明了不能进行流动相浓度的梯度设置,不知道我说的你是否理解.
智慧的弟弟
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scdx
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对于双泵的HPLC就不存在这样的问题了,因为两个泵各抽取一种溶剂,再混合在一起.
我觉得程序设定应该是初始比例水:乙腈70:30,经过25min后,水:乙腈20:80(水,乙腈各含1%乙酸)
scdx
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原文由 xj001978 发表:
不好意思,按照你的色谱条件看,应该是指的水的梯度变化由70%到20%,其实意思和我之前说的一样,但有一点特别指出,你所配备的高效液相色谱仪是肯定有两个泵的,但老式的色谱仪只有一个泵,所以我们把流动相是按照有机相和水的一个固定比例配制的,那也就说明了不能进行流动相浓度的梯度设置,不知道我说的你是否理解.


所言"水的梯度变化由70%到20%"是正确的,但是其前所言比例应该是水:流动相.因为水的比例减小后,洗脱力会增强,这是梯度洗脱的目的之一.
对么??
xj001978
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xj001978
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你们使用的高效液相是单泵还是双泵的,如果是单泵,那你要满足这个实验条件就困难了
智慧的弟弟
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