主题：【讨论】非脂肪农药多类多残留方法

这方法是GB5009系列的吗？前处理复杂，如果大批量的要多长时间，分液漏斗晃的胳膊疼。

较类似于GBT5009.218-2008标准的前处理

5009系列做的人多吗？

为啥有不少的文献是用液液分配

那是以前发表的文章吧，现在自从有的SPE固相萃取小柱后用液液分配的不多了

原文由 zyl3367898(zyl3367898) 发表:
5009系列做的人多吗？

我们偶尔要用到，看标准指引的检测方法

净化
①. 弗罗里硅土柱净化，二氯甲烷淋洗
称取4g活化过的弗罗里硅土（月桂酸值110）装入10mm内径?300mm的层析柱，上加约2cm无水硫酸钠，打开活塞，轻敲层析柱使吸附剂均实。用15mL己烷预湿柱子，不让柱子流干。用具刻度收集管的K-D浓缩器接收淋洗液。
用己烷稀释提取液，使成为10%的丙酮/己烷溶液（例如，取1mL丙酮浓缩液，以己烷定容至10mL）。将此溶液转移到柱子上，流速约5mL/min。用3mL己烷润洗容器壁两次，过层析柱，再用少量己烷淋洗层析柱壁。用50mL淋洗液（50%二氯甲烷∶1.5%乙腈∶48.5%己烷，v/v/v）以约5mL/min流速淋洗层析柱。
浓缩：在K-D浓缩器中加适量沸石，浓缩淋洗液至适当体积，一般与净化前移取的提取液体积一致，例如，净化前移取1mL浓缩的提取液稀释成10mL 10%的丙酮/己烷溶液，净化后的淋洗液也浓缩为1mL。定容待测。
②. 弗罗里硅土柱净化，乙醚/石油醚淋洗
在22mm内径的层析柱内加活化过的弗罗里硅土约10cm（或根据月桂酸值决定用量），再加入约1.5cm的无水硫酸钠。用40-50mL石油醚预浸润柱子。用具刻度收集管的K-D浓缩器接收淋洗液。
用丙酮稀释浓缩后的提取液至10 mL并转移到100 mL具塞量筒中，用石油醚润洗容器，再用石油醚稀释到100mL；塞紧，混匀。
转移稀释后的提取液到柱子上，使其流速约5mL/min。
用200mL 15%乙醚/石油醚以约5mL/min的速率淋洗层析柱。
更换K-D瓶，用200mL 50%乙醚/石油醚淋洗，淋洗速率约5mL/min
在K-D浓缩瓶中加入沸石，浓缩淋洗液至所需要的量。例如， 提取⑴法提取液中的含水量为85%，最终定容体积是5mL，净化后溶液的浓度是5.8mg/μL，即，100 ?80/（200 85-10）=29g，29g/5mL=5.8 mg/μL。
需要体积小于5mL时，用双球微Snyder柱或微型Vigreaux柱。定容后待测。
③. 固相提取柱（SPE）净化
此净化法对于具毛细管柱的气相色谱检测具有更好的净化效果，对极性和非极性残留物都有很好的回收。
在75mL的容器内放0.45μm滤膜，把SAX或代替品于滤膜上，再把PSA或代替品接到第一个柱子上。用40mL丙酮润洗柱子；接着用10mL丙酮/石油醚（1/2, v/v）淋洗，弃去洗脱液。用10mL石油醚稀释5mL浓缩的丙酮提取液并混合，转移到容器里，用加压淋洗，用少量丙酮/石油醚（1/2, v/v）润洗管子5次，在前一次的润洗液至柱子顶端时再进行下一次的淋洗。
混合K-D瓶收集液，加沸石浓缩溶剂；开始慢慢蒸发，仅在蒸汽中放收集管。当浓缩至收集管中约2mL溶剂时，通过施奈德柱加100mL石油醚再浓缩至2mL左右，再加50mL石油醚浓缩至2mL左右。小心加25mL丙酮浓缩至2mL左右。在浓缩过程中，不得让溶剂蒸发至干。最后用丙酮定容到所需体积。
SPE柱：75mL  Bond Elut 具贮液杯；
25mm 注射过滤器，0.45μm 尼龙66 具1μm预过滤
SAX  SPE 柱或替代品，500mg
PSA  SPE 柱或替代品，500mg

乙腈提取法：本方法适合应用于非脂肪样品中相对非极性农药多残留分析。
    ⑴．提取
①. 含水量＞75%、含糖＜5%的植物或其他食品
称取100g切碎混匀的样品于匀浆瓶内，加200mL乙腈，（可以加10g Celite助滤剂）。高速匀浆2min，经铺有滤纸的布氏漏斗真空抽滤，转移滤液于250mL量筒，记录体积(F)后将定量的滤液转入1L的分液漏斗。用同一量筒准确量取100mL石油醚，倒入分液漏斗中，剧烈振摇提取1-2min。
加10mL饱和氯化钠溶液及600mL水。横握分液漏斗剧烈振摇30-45秒（混合不充分可能会导致一些农药回收率低，如六六六，TDE）。静置分层后，弃去水相，用水轻轻冲洗有机相2次，每次100mL。弃去冲洗水液，有机相转入100mL具玻塞量筒，记录体积（P）。
加15g硫酸钠于量筒内，盖紧塞子，用力振摇，提取液与硫酸钠在一起的时间不要超过1h，否则会因吸附造成有机氯农药的损失。
将溶液直接过弗罗里硅土柱净化，或在K-D浓缩器先浓缩至5-10mL后再过弗罗里硅土柱。

②. 鲜蛋类
将合在一起整蛋的蛋黄和蛋白低速搅拌至少5min，至样品均匀为止。低速搅拌，可使样品起泡最少。
称取≤25g彻底混匀的蛋黄和蛋白，放入匀浆瓶，加200mL乙腈。继续按①“高速匀浆2min…”同样处理。
计算加入弗罗里硅土柱净化的样品量（G）时，除T=215（25g全蛋中15mL水与200乙腈，缩小体积忽略不计）外，其余均同①计算。
③. 含水量＜75%的植物或其他食品
磨碎样品并过20目筛
称取20-25g样品放入匀浆瓶，加350mL含水35%的乙腈（加10g助滤剂Celite）。如果样品量需要较多，可另加足量的提取混合液，使其湿润且可以彻底混合。
高速搅拌5min，经放有滤纸的布氏漏斗，抽滤至抽滤瓶内。取≤250mL滤过的提取液，记录体积（F），继续按①，“将定量的滤液转至1L分液漏斗，…”同样处理。
同①计算加入弗罗里硅土柱样品的克数，除T为样品中水的毫升数+含35%水的乙腈的毫升数。忽略体积缩小的校正数。如果样品含水量＜10%直接等于混合提取液的体积。
④. 含水量＞75%，含糖5~15%的植物或其它食品
称取100g样品于匀浆瓶内，加200mL乙腈和50mL水。高速匀浆2min，经放有滤纸的布氏漏斗抽滤入抽滤瓶内。转移≤250mL过滤后的提取液于250mL的量筒中。记录体积（F），继续按①，“把定量滤液移入1L分液漏斗，…”同样处理。
同①计算加入弗罗里硅土柱的实测样品的克数，除T为样品中水的毫升数+所加乙腈的毫升数+添加水的毫升数（要校正体积缩小的毫升数）。当添加50mL水时，在含水量为85%的食品中T是325，因为80-95mL的水和200mL乙腈混合后缩小体积为5mL。
⑤. 含水量＞75%，含糖＞15%的植物或其它食品
称取100g样品于匀浆瓶内，加入已加热的（75℃）200mL乙腈和50mL水的混合液。
例如要分析葡萄干，称取50g样品，分别加热50mL水和200mL乙腈至75℃。加40-50mL热水至称量葡萄干的容器内，搅拌或摇晃使葡萄干在水中分散均匀。转移到匀浆瓶，用剩下的水冲洗容器，并入匀浆瓶内，再用热的乙腈冲洗容器，并入匀浆瓶内，最后把剩余的乙腈都倒入匀浆瓶内。高速搅拌2min，经放有滤纸的布氏漏斗抽滤入抽滤瓶内。在热的滤液变冷之前，转移≤250mL经过滤后的提取液于250mL的量筒中。记录体积（F）。继续按①，“把定量滤液移入1L分液漏斗，…”同样处理。
同①计算加入弗罗里硅土柱的实测样品的克数，除T为样品中水的毫升数+所加乙腈的毫升数+添加水的毫升数。（要校正体积缩小的毫升数）。当添加50mL水时，在含水量为85%的食品中T是325，因为80-95mL的水和200mL乙腈混合后缩小体积为5mL。

⑵. 净化
①. 弗罗里硅土柱层析净化
在22mm内径的层析柱内加活化过的弗罗里硅土约10cm（或根据月桂酸值决定用量），再加约1.5cm的硫酸钠，用40-50mL石油醚预浸润柱子。用具刻度管的K-D瓶接收淋洗液。
将样品提取液转移到柱子上，使其流速约5mL/min。用5mL石油醚淋洗容器和硫酸钠（如果有硫酸钠）两次，转移淋洗液到柱子上，再用另外的少量石油醚淋洗层析柱的内壁。
用200mL 6%乙醚/石油醚的淋洗液淋洗层析柱，淋洗速率约5mL/min；更换K-D瓶，用200mL 15%乙醚/石油醚淋洗，淋洗速率约5mL/min；更换K-D瓶，用200mL 50%乙醚/石油醚淋洗，淋洗速率约5mL/min。
在K-D浓缩瓶中加入沸石，浓缩淋洗液至所需要的合适的量。浓缩的量要求小于5mL时，需要使用双球微Snyder柱或微型Vigreaux柱。定容后待测。
②. 弗罗里硅土柱层析备择方法
同①准备弗罗里硅土柱。
样品提取液转移到柱子上，使其流速约5mL/min。用5mL己烷淋洗容器和硫酸钠（如果有硫酸钠）两次，转移淋洗液到柱子上，再用另外的少量己烷淋洗层析柱内壁；用200mL洗脱液（20%二氯甲烷/己烷, v/v）以约5mL/min的速率淋洗层析柱；更换K-D瓶，用200mL洗脱液（50%二氯甲烷/0.35%乙腈/49.65%己烷, v/v/v ）以约5mL/min的速率淋洗层析柱；更换K-D瓶，用200mL洗脱液（50%二氯甲烷/1.5%乙腈/48.5%己烷, v/v/v）。以约5mL/min的速率淋洗层析柱；在K-D浓缩瓶中加沸石，浓缩各淋洗液至适量。浓缩的量需要小于5mL时，用双球微Snyder柱或微型Vigreaux柱；定容后待测。
选用合适的检测方法对残留物进行定性和定量测定。

这么多步骤，每步都有消耗，回收率可能会低。