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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】为何增加进样量，峰型变差

浏览0 回复22 电梯直达
夏天的雪
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发表于：2018/06/13 08:48:46 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

在做一个实验的过程中发现，粉色圈内的四种物质随着进样量的增加峰型变差，30min左右的物质峰型不受进样量的影响。
通过谱图和其它实验可以排除：
1、增加进样量，色谱柱饱和，因为高浓度进样时峰型很好；
2、色谱柱柱效降低，因为除了这四个峰，后面的峰型很好；
大家帮忙分析一下原因，还有哪些因素会产生这样的现象。
色谱条件：甲醇：水，梯度洗脱
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2018/6/13 9:48:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
高低浓度相差多少
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2018/6/13 9:48:39 Last edit by dadgoh
支点
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2018/6/13 10:52:17 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品基质和流动相差异挺大吧。
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夏天的雪
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2018/6/13 11:42:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:
高低浓度相差多少
差不多十倍
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夏天的雪
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2018/6/13 11:43:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 支点(zhx_fs_ln) 发表:
样品基质和流动相差异挺大吧。
混合标准溶液，标准溶液用的甲醇稀释的，流动相是甲醇：水
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2018/6/13 11:44:18 Last edit by bingwang228
moviehua
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2018/6/13 12:11:19 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度较低的时候流动相对样品是有一定影响的。
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赫拉克勒斯
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2018/6/13 13:26:35 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是溶剂效应
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支点
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2018/6/13 13:52:47 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
混合标准溶液，标准溶液用的甲醇稀释的，流动相是甲醇：水
用初始流动相稀释标液应该就没有这个问题了。
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dadgoh
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2018/6/13 15:38:16 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进样60ul走梯度造成的
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2018/6/13 16:31:53 Last edit by bingwang228
lavinia
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2018/6/13 15:47:04 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉是标品溶剂的问题
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夏天的雪
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2018/6/13 16:27:33 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 moviehua(moviehua) 发表:
浓度较低的时候流动相对样品是有一定影响的。
低浓度，小的进样体积没有出现异常；低浓度，大的进样体积出现了异常
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