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主题：【已应助】【求助】求助！柱子被蛋白沉淀污染了，怎么冲洗?

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floweryu
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发表于：2006/12/29 16:22:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请教做过生物样品分析的战友们，我的色谱柱被污染了，怀疑是血浆中的蛋白在有机溶剂作用下沉淀出来了，所以所有的峰都是肩峰，请问谁遇到过这个问题，怎样清洗柱子才能把沉淀彻底冲出来。我的柱子才用了不久，还很新的。 柱压也不高。
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2006/12/29 17:54:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你在试验中有用预柱吗？如果有预柱那就没有什么问题，只要先用水再用有机相多冲洗一下就没有什么大的问题了
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zhoushuyun
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2006/12/30 10:25:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果是蛋白样品污染的话，可以（1）重复进样少量的二甲基亚砜（DMSO）,（2）梯度洗脱，从10%到90%的0.1%TFA乙腈溶液，A=0.1%TFA水溶液，B=0.1%TFA乙腈溶液，（3）流动相

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floweryu
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2006/12/30 13:38:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有预柱的，用有机相和水都分别冲过了，不行。
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wsy18
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2006/12/30 13:43:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相网上培训课件……色谱柱清洗与再生[/url]
供参考。
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xiaoweicheng
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2007/1/5 9:46:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果柱效损失是由于吸附的蛋白引起，可以用0.1N的硝酸和四份异丙醇配制的溶液清洗柱子，以低流速，正常流速的20％冲洗过夜最有效。
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shelleytt
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2013/6/13 14:52:01 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaoweicheng(xiaoweicheng) 发表:
如果柱效损失是由于吸附的蛋白引起，可以用0.1N的硝酸和四份异丙醇配制的溶液清洗柱子，以低流速，正常流速的20％冲洗过夜最有效。
0.1N的硝酸和四份异丙醇配制的溶液，请问四份异丙醇是多少啊？我的柱子就被蛋白污染了，急需解决。
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