主题：【第十一届原创】盲样检测中的几大失误之处

盲样检测中的几大失误之处

      去年年底单位进行双认证复查评审，领导定了我作为此次盲样的检测人员，为此我提前一个月，在实验室对32种农残进行了加标回收率试验，所以我信心满满，势必顺利通过盲样考核，但想心事成并非那么容易，此次盲样是西葫芦有机磷中甲基对硫磷和有机氯中甲氰菊酯的盲样测试，用的是NY/T 761-2008方法，结果在盲样测试中出现了几大失误之处，现整理出来与大家一起分享一下，避免大家走弯路。
      一、 实验部分
      1.1 仪器与试剂
      gc450气相色谱仪（美国布鲁克公司），PFPD、ECD检测器，高速分散均质机(上海标本模型厂)、氮吹仪、快速混匀器。乙腈（色谱纯）、正已烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。
      1.2实验方法
    根据《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》（NY/T 761-2008）进行检测。
    1.3 标准溶液的配置
    由农业部环境保护科研监测所提供，质量浓度均为100ug/mL，有机磷的标液用丙酮稀释至10.0ug/mL。有机氯的标液用正已烷稀释至10.0ug/mL。

图1：配制标液

    1.4实验条件
    有机磷的检测条件  色谱柱：VF-5MS（30m×0.25mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以20℃速度上升到130℃，再以5℃上升到200℃，再以15℃上升到250℃，保持11min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃；氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空气流速：17mL/min；氢气流速14mL/min。
    有机氯的检测条件 色谱柱：VF-1ms（30m×0.32mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以15℃速度上升到280℃,保持10.00min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃，氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min。
    1.5前处理过程

图2：准确称取样品25.0g，称取5-7克盐。并分别加入50mL乙腈。

图3：匀浆及过滤

图4：剧烈震荡具塞量筒、吸液及80度氮吹

图5：氮吹近干时，加5mL丙酮。盖铝箔，在混匀器上混匀。用一次性针管吸液，加滤膜过滤膜后打入2ml进样瓶上机测定。

图6：预淋洗小柱、丙酮+正已烷(10+90) 淋洗小柱、50度氮吹、加盖铝箔。正己烷定容，混匀，吸取2mL至进样瓶，上机测定。

    二、盲样前处理过程中出现的问题
    在准备盲样时我称取了5个25g样品，可供评审老师多种选择，还准备好了10ug/mL的甲基对硫磷和10ug/mL的甲氰菊酯标液，一切准备就绪，评审老师进入实验室加标，我回避，加标量不详。加标完毕我进入实验室开始前处理。原以为很顺利的实验，出现了诸多问题。
    2.1破碎样品用的笋瓜未提前上机测试
    做盲样用的样品购买回来后经过清洗直接破碎至浆状，装样品袋备检。当评审老师询问是否提前上机测试过，购买的笋瓜是否有含有测试的甲基对硫磷和甲氰菊酯。我们说已经清洗干净了，评审老师没说什么，但最后证明，还是应该提前上机测定一下。请看图

    2.2 前处理操作失误
    此次盲样测试在前处理过程中出现了重大失误，在80℃氮吹后，误把加了正己烷的溶剂当成有机磷倒入离心管，并进行3次1mL丙酮洗烧杯并定容至5ml，混匀后加滤膜打入进样瓶2ml。再进行第二个样品操作时，猛然发现加错试剂，只好从原具塞量筒重新吸取10mL,好在原具塞量筒的液还够吸。经此一事得出经验教训，不管遇到什么事情都不能慌张，要小心谨慎，千万不可把试剂加错。
    2.3要实事求是，不能抱有任何侥幸心理
    2.3.1平行样不平行
    在这次盲样考核中，有机磷甲基对硫磷两个平行样很平行，可判断加标量为0.12mg/kg.值得一说的就是有机氯中甲氰菊酯加标量的测定，在一步一步小心谨慎的做完前处理，上机测定，等待的心情是紧张的，但看到结果的那一刻更是一下跌入谷底，两个本该平行的平行样出现不平行，由于之前在前处理出现的失误加上现在的不平行，当时的心情真是五味杂陈，但不敢多想，赶紧重新从原具塞量筒中再吸10mL，再做一遍，此时已经凌晨，上机测定，没想到拿到的结果和上次一样，仍是不平行。这可如何办？再来一次，这次具塞量筒只剩5mL了，再做一遍，上机测定，可没想到拿到的结果仍和前几次一样，仍是不平行。
    2.3.2验证
    这可怎么办？盲样已经没有了。重来没有机会了，为了验证我们在提前多预备的样品中自己加了个标，看结果是否平行。结果出来了，我们自己加标的样品结果却是平行的。这可怎么办？最后选择算个平均值吧，评审老师一看结果说，不可能是平行的吧，我的加标量不一样，你怎么能做出平行。此话一出当时。。。。。。啥也不说赶紧拿出原始实验记录本让老师看，评审老师看后点点头，这就对嘛有什么是什么赶紧出图报结果。虽然有惊无险，但也得到一教训，那就是实事求是，还有一点就是对自己还要多一点信心。

原始记录

    三、结论
    从这次盲样考核来说，还是有许多需要注意的事项：
    1、做盲样用的样品，破碎后一定要提前上机做基质测定，检测样品本身是否含有考核项或是否与目标物太近，不好判断。
    2、一定不要把试剂搞混，不能把丙酮当正己烷，也不能把1:9当正己烷使用。前处理的谨慎与否直接影响数据的准确度。盲样只有那么多，推倒重来的机会几乎没有。
    3、还要注意一定要实事求是，结果是什么报什么。要相信自己。
    总结的有不到的地方，还请各位老师指导。