主题:【第十一届原创】巧用比浊仪协助判定试管凝集试验结果

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分析者端木精英队发表于:2018/07/27 11:15:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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7月二等奖
巧用比浊仪协助判定试管凝集试验结果
1背景介绍
布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌属细菌致人畜共患的传染病,世界范围性威胁人类健康和影响畜牧业发展,其临床特征是雌性流产、乳腺炎、不育和各种组织(如睾丸、关节)的炎症。世界动物卫生组织(OIE)将布病列为B类重要传染病,中华人民共和国传染病防治法将布病列为乙类传染病。
为筛查和及时确认动物是否感染布病,每年农业部门要对易感动物(如奶牛、羊)进行定期监测,常用的方法为试管凝集试验。具体做法是:将血清按一定比例进行倍比稀释,加入抗原置于37℃温箱中反应24h,取出检查并记录结果。
每次实验需配制比浊管,作为反应程度的判定依据。因抗原为白色的混悬液,按不同比例稀释后呈现不同的混浊程度,故可以作为判定反应程度的依据。比浊管配制方法如下:

管号抗原稀释液清亮度%记录标记
10.001.00100++++
20.250.7575+++
30.500.5050++
40.750.2525+
51.000.000-

2试管凝集试验存在的问题
按照标准要求,样品的反应程度(即浊度)的判定采用目视法。该法在不同实验人员之间存在很大的不确定性,容易引起误判。
3改进
实验室有一台生物梅里埃公司生产的DENSIMAT电子比浊仪,原用于测定细菌悬浊液麦氏单位。因试管凝集试验结果判定中,只是将样品管与5支比浊管进行浊度比较,并不涉及浊度的实际数值,故尝试利用比浊仪协助判定试验结果。方法如下:
3.1测试比浊管浊度
逐一将比浊管插入比浊仪中,读取浊度值。经反复测试,读数均非常稳定,一般多次测定中只是偶尔会出现0.1个单位的偏差,故采用多次测定取出现次数最多的读数为准。实测值如下:
比浊管号12345
浊度值0.10.61.2

1.6

1.8

记录标记++++++++++-

3.2测试样品管浊度
逐一将样品管插入比浊仪中,读取浊度值,并进行反应程度的标记。因样品管浊度值与比浊管浊度值不完全一致,采用取各比浊管间平均值后进行判定,具体如下:
浊度值< 0.350.35~0.90.9~1.41.4~1.7>1.7
记录标记++++++++++-

本次实验共检测样品5份,每份样品4个稀释度,实测值及判定如下:
  样品号  1:25  1:50  1:100  1:200  效价判定
浊度值标记浊度值标记浊度值标记浊度值标记
10.4+++0.4+++0.3++++0.2++++≥1:200
2

0.2

++++

0.1

++++

0.4

+++

1.5

+

1:100 

3

1.9

-

1.8

-

2.1

-

1.9

-

<1:25 

4

0.1

++++

0.1

++++

0.3

++++

1.5

+

1:100 

5

0.1

++++

0.2

++++

0.4

+++

1.3

++

≥1:200 

6

0.3

++++

0.3

++++

0.2

++++

0.2

++++

≥1:200


4小结
利用比浊仪协助进行试管凝集试验结果的判定,可以消除不同实验人员之间的主观性,将结果予以数字化,提高结果判定的可靠性,值得引入试管凝集试验中对结果进行判定。
该帖子作者被版主 happy美丽10积分, 2经验,加分理由:鼓励原创~
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qianguiyun1
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happy美丽
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人眼判定有时候主观性比较大,跟仪器相比较,肯定是仪器更科学一点~
栀子花开
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确实如此,目前的一些疫病检测项目,还是依靠目视判定结果,急需选择合适的设备将结果数字化。
wccd1
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将主观判断进行量化,用数据说话,如果是线性关系的话,是个好方法。
wangjunyu
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栀子花开
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我们所做的试管凝集试验,浊度一般不会超过2.0,浊度仪至少可以检测浊度3.0,所以用于试管凝集判定没问题
端木
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