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主题：【求助】每次测样品时都要扫一次空白液吗？

浏览0 回复8 电梯直达
xiaoran
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发表于：2007/01/03 19:25:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近做了一些分子荧光的实验，发现同一样品扫描时强度忽高忽低，导致结果没有规律。怀疑是背景值的问题，是不是每次扫样品前都要扫空白液啊？
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2007/1/3 20:48:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaoran 发表:
最近做了一些分子荧光的实验，发现同一样品扫描时强度忽高忽低，导致结果没有规律。怀疑是背景值的问题，是不是每次扫样品前都要扫空白液啊？

（1）在荧光分析中你遇到的这种现象比较普遍；首先你要判断是仪器的问题还是样品的问题。
（2）用纯净水（最好是二次蒸馏水）做为样品，激发波长为350nm，发射从360nm扫到420nm，在397nm处应该出现拉曼峰，并且做重复扫描，看看重现性如何。如果重现性好，说明问题出在你的样品上；反之说明仪器本身有问题，其中大多出在氙灯方面。
（3）如果是样品的问题则原因很多，其中最大的可能是样品浓度太高或样品本身较为浑浊。
（4）如果是背景的原因，假如背景较为复杂，预扫空白也无济于事；因为荧光不是紫外可见分光光度计。
因你没有介绍使用的是何种型号的仪器及何种样品，只能猜测回答，仅供参考吧！
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xiaoran
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2007/1/3 21:47:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多谢解答！我再做几组看看，可能是样品不稳定，因为生成金属配合物
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onlyee
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2007/1/4 17:06:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不需要每次都扫的，可能是样品或者仪器不稳定
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shidaixing
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2007/1/5 8:40:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我就是每次都扫
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swimming2345
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2007/10/17 20:38:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

同意1楼观点，一般不至于每次都要扫描空白


原文由 xiaoran 发表:
最近做了一些分子荧光的实验，发现同一样品扫描时强度忽高忽低，导致结果没有规律。怀疑是背景值的问题，是不是每次扫样品前都要扫空白液啊？
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kangfuxing
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2007/11/9 12:25:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般开一次机扫描一次就可以了.等到第二次开机的时候再扫空白,因为每次开机光源都不一样.有点差别.
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pennydarcy
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2007/12/11 16:05:43 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也有可能是光源和光电倍增管没有做校正？
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amini1000
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2007/12/12 11:22:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不需要每次都扫,因为荧光的值是变化的,您看看国标方法就明白了,不是绝对值,需要的都是相对比值.
不要把荧光方法与紫外方法混为一团.
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