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液相色谱（LC）

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主题：【讨论】色谱柱再生越做柱效越差？咋回事？

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xiaogezi

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发表于：2018/12/31 16:04:55 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

就用10%乙腈-异丙醇-10%乙腈，这么冲结果冲完色谱峰尖都没了，前后两根柱子都是，普通的C18反相柱，流速是0.5ml，非常郁闷，还不如单纯的用10%乙腈反冲效果好

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2018/12/31 17:15:32 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相色谱柱再生正确的做法是100%甲醇小流速冲洗4小时以上，然后是100%异丙醇小流速冲洗，转换成50+50异丙醇+正己烷，接下来就是100%正己烷，100%二氯甲烷，通过异丙醇过度到甲醇100%即可。

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言逊

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2018/12/31 17:47:25 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子再生不对？不能反冲！

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lijing320323

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2018/12/31 18:45:48 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

换根柱子吧

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dadgoh

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2018/12/31 18:58:33 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还是要找到适合的冲洗方法。

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有水有渝

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2018/12/31 22:28:26 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

再生的不够彻底，光用异丙醇有可能只是把污染物从入口筛板和柱头填料冲洗到了柱中，反而使柱效更差。再生估计还是要再用清洗能力更强的氯仿等。再生我是不推荐，常常是吃力不讨好。

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2019/1/1 8:26:46 Last edit by xky0230699

wsy18

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2018/12/31 22:56:14 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最好用柱子生产厂家推荐的再生方法做。

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yy_0324

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2019/1/1 3:01:27 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由有水有渝(xky0230699)发表:再生的不够彻底，光用异丙醇有可能只是把污染物从冲洗到地柱中，反而使柱效更差。再生估计还是要再用清洗能力更强的氯仿等。再生我是不推荐，常常是吃力不讨好。

学习了色谱柱再生越做柱效越差相关知识。

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dingshx

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2019/1/1 7:35:04 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

了解一下

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检测老菜鸟

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2019/1/1 10:17:16 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般情况下，顺接色谱柱，按如下溶剂顺序及条件冲洗：95%水-5%甲醇（或乙腈）（1.0ml/min，1h以上）→100％甲醇（1.0ml/min，1h以上）→100％乙晴（1.0ml/min，1h以上）→75％乙晴-25％异丙醇（0.5ml/min，10倍柱体积以上）→100％异丙醇（0.5ml/min，10倍柱体积以上）→100％二氯甲烷（0.5ml/min，10倍柱体积以上）→100％正己烷（0.5ml/min，10倍柱体积以上，根据实际情况可忽略）→100%异丙醇（0.5ml/min，20倍柱体积以上）→95%水-5%甲醇（或乙腈）（0.5ml/min，30min；再升至1.0ml/min，10倍柱体积以上）→检测用流动相平衡2h或至基线平稳，进样测试。

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