主题:【求助】反相HPLC分离天然多肽

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Insm_31ac6d6a
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最近实验从天然中药材中分离小分子多肽。
    粉碎药材后,PBS浸泡,离心取上清,3000Da透析袋透析,收集小分子多肽。分子排阻色谱分离,收集洗脱峰,进行HPLC分离鉴定。
    采用梯度洗脱,A:水;B:含有0.1%TFA的乙腈。0 min,A:99%,B:1%;25 min,A:95%,B:5%;32 min;A:85%,B:15%。
    问题是不加TFA没有多肽峰,加了0.1%TFA,基线不稳。整个实验中HPLC的重复性很差。请问各位老师,有什么好方法吗?不胜感激。
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检测老菜鸟
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hujiangtao
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