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主题：【已应助】如何设计样品的梯度洗脱过程

浏览0 回复1 电梯直达
tokki0119huhu
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发表于：2019/12/09 13:53:58 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品是 酪蛋白磷酸肽 流动相是 水 乙腈 磷酸缓冲盐 需要进行梯度洗脱 进行分析
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2019/12/9 13:58:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是我在网上搜索到的答案，希望对您有所帮助。
时间  A      B
0          80    20
10        10    90
14        10    90
14.1    80    20
20        80      20
这个例子能说明你的问题，前面0-10分钟采用的梯度是等比例的把A80%和B20%变换成A10%和B90%，而当10分钟时，已经变换成了A10%和B90%，这只是梯度变换成了这个比例，实际上，因为液相色谱的死时间问题，在柱子中的比例还没到这样的比例，再就是现在这个比例应该是有机相最多的时候，这时会把一些难于洗脱的物质洗脱出来，一般还需要几分钟的时间吧，然后过了四分钟，觉得洗脱完全了，就在14.1分钟立即把梯度换成了A80%和B20%，接下来其实现在已经不在分析样品了，是在平衡系统了。在实际运行中，我做的这个梯度只有14分钟再加上大约2分钟的死时间，也就是说大约16分钟的时间是整个样品中的谱图正常时间，16分钟之后不可能再有峰出来了，如果有峰说明方法梯度设置有问题了。
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