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主题：【已应助】柱压问题

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tanglong119
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发表于：2019/12/20 13:00:10 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我前两天用纯甲醇冲柱子是90多点bar，流速是1ml/min。今天用纯甲醇冲柱子是120多bar，流速是0.5ml/min。请注意我用纯甲醇冲柱子之前用水：甲醇=95：5的比例冲洗了系统和柱子至少一小时，流速也是1ml/min。请问各位液相高手这是什么原因呢？我们使用的柱子是安揭伦C18的柱子，流动相是甲醇和磷酸盐，磷酸盐的浓度是0.02mol/l。而且用流动相平衡柱子的时候基线一直不平，出现不规律的波动，根本就做不了分析
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2019/12/20 13:12:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题表述的不太明确。你说的“注意我用纯甲醇冲柱子之前用水：甲醇=95：5的比例冲洗了系统和柱子至少一小时，流速也是1ml/min。”是在压力120bar之前，还是90bar之前？
感觉问题不大。磷酸盐浓度不算大，用纯甲醇冲之前最好用5-10%甲醇冲半小时柱子，再用纯甲醇，但是进缓冲盐流动相时候，一定再用5-10%甲醇过渡一下。我个人认为用甲醇多冲一会压力应该会降低，可能是柱子没平衡好。
至于基线不平，首先应多平衡一会，缓冲盐流动相至少20倍柱体积平衡。再者注意管路中是否有气泡，充分PURGE.
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