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主题：【已应助】FG就是在加酶前测定的葡萄糖含量？

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haishinihao
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发表于：2020/01/19 11:23:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我的试验方法如下：淀粉样品（1.00g，干基）悬浮于乙酸钠缓冲溶液（20mL，0.1M，pH5.2）中，向反应瓶中加入5颗玻璃珠，混合5min。样品放在沸水浴中加热30min，结束后立即放入37℃水浴中，待温度平衡后加入10mL混酶，开始振荡反应并准确计时。分别在20min和120min取0.50mL的试样与10mL的乙醇（66%，v/v）反应来结束酶反应，用GOPOD试剂盒测量淀粉的消化性。每个试样做平行试验。混和酶的制备：3g的猪胰液酶分别加入到装有20mL去离子水的离心管中，搅拌10min，然后以1500g转10min。取54mL的上清液与6mL稀释的淀粉葡糖苷酶溶液和4mL的去离子水混合。根据酶活用超纯水配置290U/mL猪胰α淀粉酶和15U/mL糖化酶，我买的这两种酶都是粉末状的。样品中快消化淀粉( RDS ) 、慢消化淀粉( SDS ) 、抗消化淀粉( RS ) 的质量分数具体计算公式如下：
RDS（%）＝（G20－FG）×0.9／TS
SDS（%）＝（G120－G20）×0.9／TS
RS（%）＝[TS－（RDS＋SDS）] ／TS
式中：G20—淀粉酶水解20 min后产生的葡萄糖含量(mg)；
G120—淀粉酶水解120 min后产生的葡萄糖含量(mg)；
FG—酶水解处理前淀粉中游离葡萄糖含量(mg)；
TS—样品中总淀粉含量(mg)。
测定的结果：
1.快消化淀粉含量很低，10%都不到，也就是在20min时的测定量很低，这是本试验最大的问题；
2.式中的TS还需要对样品测定下吗？还是就是称取的1g淀粉?我的样品是甘薯淀粉
3.FG就是在加酶前测定的葡萄糖含量？
不知道哪里出了问题，请大神们指教，谢谢了
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wangjun53022263
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2020/1/19 11:39:47 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是我的酶有问题，我不是用的Sigma公司的，糖化酶也不是液体的
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