主题：【分享】【实战宝典】如何避免液相色谱分析中的“溶剂效应”？

浏览0 回复0 电梯直达

小官人

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2021/03/22 15:45:26 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

问题描述：“溶剂效应”会导致哪些异常峰型？如何避免溶剂效应？在HPLC分析中样品溶剂的选择与流动相有什么关系？

解答：（1）当样品溶液的溶剂强度强于流动相溶剂强度时可能会导致峰前端展宽、峰分叉，即色谱图上较早洗脱的峰扭曲变形或者开叉，与此同时较晚洗脱的峰则较为尖锐与对称，这种现象一般称之为“溶剂效应”。

（2）这里的强溶剂可以理解为洗脱能力强的溶剂，色谱常用的有机相是甲醇与乙腈，纯乙腈就是洗脱能力最强的溶剂。流动相的洗脱能力越强，在其他条件不变的情况下，出峰越快，保留时间越短。

（3）液相色谱分析中产生“溶剂效应”的原因主要有：

a.样品溶液的溶剂强于流动相。如图5-5所示，当样品溶液的溶剂是100%乙腈（强溶剂），而流动相组成较弱（18%乙腈/72%水）：第一个峰是开叉的，并且与第二个峰相比，明显地变宽了（图5-5上）；当样品溶液的溶剂变成流动相时，所有的峰形都改善了，且变得尖锐（图5-5下）。这是因为当样品进样时，有可能出现峰展宽，最佳的样品溶液组成和体积将会保持在10%甚至更低，在这个例子里，当样品溶剂与流动相溶剂强度不同时，此时有些样品分子溶解在强溶剂中，并随强溶剂流过柱子，而有些则溶解在流动相中，从而导致峰分叉。

图5-5 样品溶剂对组分峰型影响

b.进样量比较大。

c.样品的pH值与液相色谱流动相pH悬殊，比如酸性流动相体系，样品pH偏碱性（pH=10），这种情况下也很有可能发生“溶剂效应”。

（4）其实上面三个原因归结起来就是一个原因：样品的溶剂与流动相存在一些不一样。当溶解样品的溶剂不同于流动相时，样品溶剂与流动相发生混合，样品溶剂被冲稀。如果进样溶剂之强度高于流动相，样品在瞬间会表现为在较强溶剂中，并以较快速度通过色谱柱，表现在色谱图上就是：色谱峰的保留时间缩短。当进样溶剂与流动相混合时，一部分分子会先与流动相混合，致使这些分子通过色谱柱的速度发生变化，使峰形扭曲，发生变形。

（5）所以要解决这个问题的最佳方案就是，使用流动相的起始梯度溶解样品，如果由于溶解度的问题，不得不改用其余的溶剂，那就只能降低进样体积来解决。

领取更多《实战宝典》请进：http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI

恭喜您！提交成功

主题：【分享】【实战宝典】如何避免液相色谱分析中的“溶剂效应”？