原文由 mhq111111 发表:
我对液相色谱实验有这样一个体会:入门容易,成为高手难。
做过实验的都知道,对于简单样品、成熟方法,HPLC很方便,尤其是有了自动进样器以后,做实验倒是还方便些,大量的时间都在样品前处理和数据处理计算上。
但是偶尔,会碰到让人心烦的事情。比如,做间苯三酚的有关物质实验。
用的柱子是Zorbax C18,250*4.6mm,5μ.
Agilent 1100,UV检测器 流速:1.0ml/min
流动相乙腈-水(用磷酸调pH到3.0)(10:90)
配制样品的溶剂就是流动相。
结果空白进样后,7.6min出来一个小峰,峰面积在30左右,再进一针,只有25了,再进一针,没有了!
样品溶液两个浓度进样,其他位置的峰重现性极佳,就是7.6min出的峰忽大忽小,后来干脆全部重新进样,终于稳定了。
碰到这样的问题,我的解决办法是这样,从理论上去判断,首先空白溶液在7.6min不应该出峰。那种异常现象没有时间去多想,否则会发疯的!一个培训的老师说过,不是每个人都能成为科学家的,更多的人只要学会应用就可以了。
样品溶液的异常情况也没有更好的解决办法,只能多进几针,取重现性好的。
写在这里,欢迎大家交流实验中出现的异常个例。
可能与你配制流动相水中有杂物质,我以前也碰到过,空白样品有小峰,分析是水有问题。还有可能是流动相过滤的0.45um膜,溶解到流动相当中,所以会出现小峰。