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主题：【已应助】T3 柱能不能走磷酸盐

浏览0 回复4 电梯直达
Ins_83adee8c
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发表于：2023/02/28 14:31:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师们好，我最近合成了一个检测酶活的探针，想用质谱检测探针底物。因为检测酶活性需要把探针与酶在磷酸盐缓冲液中共孵育，但是剪切下来的探针极性比较大，前处理液液萃取回收率太低，想直接蛋白沉淀做。

想请问一下各位老师可不可以用以下的方法：通过调整色谱方法使探针剪切下来的结构在前 3.5 个柱体积不出峰（waters T3 柱，2.1*100 mm 1.8 μm），这部分溶液直接流动切进废液中不进质谱，然后设置质谱程序在待测物出峰前 0.5 分钟流动切换进质谱分析。

有几个小问题：我们实验室以前用 C18  柱这样做过，但是新用了 T3 柱，虽然磷酸盐是无机盐但还是会有点点怕在 T3 柱上不是死体积出峰，想请教一下各位老师有没有做过类似的实验，可不可以用 T3 柱这样做呢？走完磷酸盐要怎么保养柱子比较好呢？

谢谢各位老师。
推荐答案：hujiangtao回复于2023/02/28
T3柱子比C18极性强一些，样品中少量磷酸盐问题不大，前面的已经进废液了
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2023/2/28 15:02:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
T3柱子比C18极性强一些，样品中少量磷酸盐问题不大，前面的已经进废液了
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2023/2/28 18:43:09 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
只要不是流动相有磷酸盐就没事。用完后和c18柱处理一样。
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2023/3/1 20:39:56 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
T3柱子比C18极性强一些，样品中少量磷酸盐问题不大，前面的已经进废液了
谢谢老师
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2023/3/1 20:40:16 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:
只要不是流动相有磷酸盐就没事。用完后和c18柱处理一样。
好呢，谢谢老师
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