主题:【第十六届原创】乳制品中维生素C检测

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Jun Nan Li
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乳制品中维生素C检测


1.维生素C简介

维生素C是一种水溶性维生素;

维生素C是一种具有六个碳原子的酸性多羟基化合物;

维生素C分子式为C6H8O6其分子式中2位和3位碳原子的两个烯醇式羟基容易解离,释放出H+,因此维生素C是酸性的;

维生素C自身可发生氧化还原反应,氧化型抗坏血酸和还原型脱氢抗坏血酸可以互相转变。


2.维生素C的性质:

极易溶于水及乙醇;

维生素C在酸性溶液中比在碱性溶液中稳定;

极易受碱性、光照、氧化剂、射线、盐和糖浓度、酶等因素影响。(本实验应该避光操作)


3.维生素C检测方法及相关国标

1、荧光分光光度法GB/T 5413.18   

22,6-二氯靛酚滴定法GB 5009.86


4.荧光分光光度计法

一、实验原理:

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后,与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比,以此测得食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。


二、试剂作用:

1偏磷酸-乙酸溶液A/偏磷酸-乙酸溶液B:作为维生素C的提取液,为了减慢维生素C的氧化速度,防止维生素C氧化损失,减少实验误差。(维生素C极易在空气中氧化,尤其是在碱性条件下,而在酸性介质中它受空气氧化的速度和程度稍慢且稳定)


2酸性活性炭:起到氧化剂和吸附剂的作用。


  氧化剂作用:还原型抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸


  吸附剂作用:脱色


  国标中规定酸性活性炭的用量为2g,能够使测定样品中维生素C完全氧化且吸附作用不是很明显。


3乙酸钠溶液:乙酸钠溶液在加入后存在于溶液中时间越长,荧光强度值就越低,从而降低了方法的灵敏度。


4硼酸-乙酸钠溶液(掩蔽剂):硼酸与脱氢抗坏血酸可形成不与领苯二胺反应的络合物,以此排除样品中荧光杂质(丙酮酸)所产生的干扰。


5邻苯二胺:脱氢型抗坏血酸,与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉。此溶液要临用新制,且避光。


注意:国标规定加入硼酸-乙酸钠溶液后,应静置30分钟,之后再定容至刻度。这样做的目的是使空白荧光强度值能够降低到最低值


操作过程

1)样品经过偏磷酸-乙酸溶液B定容,加入2g酸性活性炭后剧烈振摇后状态。








过滤后,滤液状态。



总结荧光分光光度计法优点


1)灵敏度高;


2)线性关系好;


3)精密度高;


4) 不受其他荧光杂质的干扰。

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