主题：【第十六届原创】乳制品中维生素C检测

乳制品中维生素C检测

1.维生素C简介

维生素C是一种水溶性维生素；

维生素C是一种具有六个碳原子的酸性多羟基化合物；

维生素C分子式为C6H8O6其分子式中2位和3位碳原子的两个烯醇式羟基容易解离，释放出H+，因此维生素C是酸性的；

维生素C自身可发生氧化还原反应，氧化型抗坏血酸和还原型脱氢抗坏血酸可以互相转变。

2.维生素C的性质：

极易溶于水及乙醇；

维生素C在酸性溶液中比在碱性溶液中稳定；

极易受碱性、光照、氧化剂、射线、盐和糖浓度、酶等因素影响。（本实验应该避光操作）

3.维生素C检测方法及相关国标

1、荧光分光光度法GB/T 5413.18   

2、2,6-二氯靛酚滴定法GB 5009.86

4.荧光分光光度计法

一、实验原理：

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉，其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测得食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

二、试剂作用：

1）偏磷酸-乙酸溶液A/偏磷酸-乙酸溶液B：作为维生素C的提取液，为了减慢维生素C的氧化速度，防止维生素C氧化损失，减少实验误差。（维生素C极易在空气中氧化，尤其是在碱性条件下，而在酸性介质中它受空气氧化的速度和程度稍慢且稳定）

2）酸性活性炭：起到氧化剂和吸附剂的作用。

  氧化剂作用：还原型抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸

  吸附剂作用：脱色

  国标中规定酸性活性炭的用量为2g，能够使测定样品中维生素C完全氧化且吸附作用不是很明显。

3）乙酸钠溶液：乙酸钠溶液在加入后存在于溶液中时间越长，荧光强度值就越低，从而降低了方法的灵敏度。

4）硼酸-乙酸钠溶液（掩蔽剂）：硼酸与脱氢抗坏血酸可形成不与领苯二胺反应的络合物，以此排除样品中荧光杂质（丙酮酸）所产生的干扰。

5）邻苯二胺：脱氢型抗坏血酸，与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉。此溶液要临用新制，且避光。

注意：国标规定加入硼酸-乙酸钠溶液后，应静置30分钟，之后再定容至刻度。这样做的目的是使空白荧光强度值能够降低到最低值

三 操作过程

1）样品经过偏磷酸-乙酸溶液B定容，加入2g酸性活性炭后剧烈振摇后状态。

总结荧光分光光度计法优点

1）灵敏度高；

2）线性关系好；

3）精密度高；

4) 不受其他荧光杂质的干扰。