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主题：【已应助】为什么菌落实验空白老是有菌，应该从哪些方面排查呢

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冰饼兵

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发表于：2024/08/29 08:34:36 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

为什么菌落实验空白老是有菌，应该从哪些方面排查呢

推荐答案：JOE HUI回复于2024/08/29

环境的可能性大，操作环境定期药物熏蒸灭菌。人机料法环一次分析排除，个人认为灭菌不完全的可能性比较大，建议使用灭菌指示剂。可以从以下方面考虑：人：操作人员手部卫生
机：灭菌设备、器材是否达到要求
料：培养基是否污染
法：操作方法是否得当
环：无菌室（超净台）环境是否达到无菌程度

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2024/8/29 9:44:45 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

无菌操作不规范：确保实验过程中的无菌操作规范，包括使用无菌器材、在超净工作台中操作、穿戴无菌实验服和手套等。
培养基或试剂污染：检查培养基和所有试剂的无菌状态，确保它们在有效期内并且无菌。
环境因素：实验室环境可能存在污染源，如空气、尘埃等。可以通过增加空气过滤、减少实验室内不必要的活动来改善。
实验器材污染：使用的器材如平皿、试管等可能未完全灭菌，应确保所有器材都经过适当的灭菌处理。
操作人员污染：操作人员可能无意中引入了微生物，应进行无菌操作培训，确保操作人员了解并遵守无菌操作规程。
培养条件不适宜：不适宜的培养条件可能导致非目标微生物的生长，应检查培养温度、时间、气体环境等是否符合实验要求。

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oscar_2007

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2024/8/29 15:29:56 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

从一下方面入手排查：
1.菌落空白一直有菌，首先要排查灭菌设备是否正常，灭菌温度是否稳定。灭菌设备是关键点。
2.第二，就是关闭你的净化台抽风装置，避免环境因素因抽风影响你的操作平台的空间环境。
3.做一个菌落空白直接放净化台，48H小时后看看有无细菌生长。如无细菌，则可能培养箱环境造成污染。
4.培养箱湿度所供水是否是纯水。
5.操作过程使用的移液枪头以及取样管是否有灭菌。如果灭菌到位，人为干扰因素不高。以及操作前净化台面是否有75%酒精清洁和手部。

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