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主题：【已应助】有关DNA检测

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发表于：2024/08/29 07:10:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品是脱氧核糖核酸物质，想测核糖核酸的含量，请问怎样测?药典没有找到方法
推荐答案：123回复于2024/08/29
测量脱氧核糖核酸（DNA）含量的常用方法包括紫外吸收光谱法、荧光染料定量法、定磷法等。紫外吸收光谱法是基于核酸分子中碱基的紫外吸收特性，特别是在260nm处的吸收峰来定量核酸的浓度。这种方法简单、快速，是实验室中常用的定量方法。荧光染料定量法则使用特定的荧光染料，如SYBR Green I，与核酸结合后通过测定荧光强度来定量核酸含量。这种方法灵敏度高，特异性好，适用于低浓度样品的定量。定磷法是通过测定核酸中磷的含量来计算核酸浓度，这种方法适用于需要高准确度的场合。
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2024/8/29 9:30:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果想测定样品中核糖核酸的含量，可以采用定糖法。

定糖法的原理是：核糖中的戊糖可在浓盐酸或者浓硫酸作用下脱水生成醛类化合物，该化合物可与某些成色剂缩合成有色化合物，可用比色法或者分光光度法测定其溶液中的吸收值，在一定的浓度范围内，溶液的吸收值与核酸的含量成正比。

具体操作如下：

1.?核糖的测定：生成的绿色化合物在λ=670nm 处有最大的吸收值。

2.?脱氧核糖的测定：DNA 中的脱氧核糖可在浓硫酸作用下脱水生成ω-羟基-γ-酮戊酸，该化合物可与二苯胺生成蓝色化合物，在λ=595nm 处有最大吸收值。

该方法的优缺点是：较灵敏，但特异性较差，凡戊糖都有此反应。
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2024/8/29 10:08:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
测量脱氧核糖核酸（DNA）含量的常用方法包括紫外吸收光谱法、荧光染料定量法、定磷法等。紫外吸收光谱法是基于核酸分子中碱基的紫外吸收特性，特别是在260nm处的吸收峰来定量核酸的浓度。这种方法简单、快速，是实验室中常用的定量方法。荧光染料定量法则使用特定的荧光染料，如SYBR Green I，与核酸结合后通过测定荧光强度来定量核酸含量。这种方法灵敏度高，特异性好，适用于低浓度样品的定量。定磷法是通过测定核酸中磷的含量来计算核酸浓度，这种方法适用于需要高准确度的场合。
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