主题：【分享】【金秋计划】体外抑菌试验整理汇总

抑菌试验1：平板计数法。
操作方法：取一定量的稀释样品涂布在平板上，形成肉眼可见的单菌落，并统计单菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。通过与组内或组间比较，从而得到样品对待测菌株的抗菌性能。
适用范围：
①固体类：薄膜、金属块、镀膜玻璃等，要求测试面积大于等于1.5×1.5cm，大于该面积按照比例添加菌液。
②液体类：样品量根据测试时样本的溶剂和浓度而定，浓度由样品特性及实验目的而定，一般不超过菌液的10%。
结果判定：进行3个重复实验计算平均值。
抑菌试验2：抑菌圈实验。
操作方法：抑菌圈实验是测定抗菌性能常用实验方法，主要用于测定样品对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用。主要方法：K-B法、打孔法和牛津杯法。
适用范围：
①固体类：薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。制样要求：金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形。布料、纸片类样本可裁剪为圆形。若样品太脆无法裁剪，可称取相应质量样品，用PBS浸泡过夜，制备成圆形药敏片。
②液体类：根据测试时样本浓度而定，一般为1 mL/种菌。
③粉末类：使用打孔器进行打孔，用粉末填充满所打的孔中，一般最少需要1g粉末样品。
结果判定：每个抑菌圈测量三次计算平均值。
抑菌试验3：OD值测定。
操作方法：将待测样品与菌液共培养后，细菌生长的培养液浊度与细菌浓度成正比，使用紫外分光光度计测定培养液的OD值。
适用范围：
①固体类：薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。
②液体类：要求样本溶液无色或者淡色。
结果判定：绘制生长时间与OD值的生长曲线图，每个点测量3次OD值。
抑菌试验4：MIC值。
操作方法：最低抑菌浓度（MIC）：能够抑制培养基内细菌生长的最低药物浓度。
适用范围：
①液体类：样品溶液需完全溶解且无色或者淡色，使用微孔板法。
②粉末类：粉末必须可溶，根据CLSI标准，最大母液浓度512ug/ml。
结果判定：MIC结果为肉眼可见无细菌生长的最小浓度，需进行三次重复实验。
实验需要注意：
①培养基配置：要求培养基灭菌温度不宜过高，培养基含糖量也不能太高，否则会导致焦化，影响实验结果判断；
②一般常规菌株，不耐药，不需要设置抗生素对照组。