所有操作人员必须严格按照本操作规程所规定操作，如遇到特殊情况需要修改操作方法，需经分管领导批准；

质量监督员、质量负责人负责监督操作规程的执行与实施。

4. 操作步骤

4.1正离子模式下PPG质量手动校正

4.1.1 Q1 Positive MS 校正

1) 在硬件配置Hardware Configure 菜单下Active 激活MSOnly (质谱仪和注射泵)；

2) 点击

，确认压力在0.4~1.1×10-5torr之间，打开“Installtion”Project；

3) 点击左边导航栏Navigation Bar 的Tune and Calibrate进入手动调谐模式，点击

，

点击

进入ready状态；

4) 双击Mannul Tuning，进入手动调谐模式；

5) 打开Q1 PosPPGs.dam文件；

6) 调整Scan rate为10Da/s；

7) 进PPG Positive 溶液(2.0×10-7M)，Stringe Pump Method,勾上use（

），先

以大流速（如30μl/min）跑1min，点击Start Syringe；

8) 开针泵，稳定后改为5μl/min的流速；选一个质量的峰优化喷雾针伸出的长度，连续扫描5min，一边调喷雾针伸出的长度，一边看Intensity，取Intensity强度最大值时喷雾针伸出的长度（开始时喷雾针伸出的长度可以设为2mm左右，通过左右调位置看哪个时候Intensity最大）；---该步是换过喷雾针才需做的，一般省略不做，调节TIS electrode 位置方法也一样。

9) 用MCA方式采集10 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表1 看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表1

Mass(Da)	Intensity(cps) (10 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(amu)
59.050	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
175.133	>=1.2×10⁶	0.6 to 0.8	<=0.1
500.380	>=9.0×10⁶	0.6 to 0.8	<=0.1
616.464	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
906.673	>=1.4×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1

10) 如果不符合表1的指标，通过调节offset参数去优化，具体步骤为：

11) 回到Mass Method 界面，切换到Resolution，点击Advanced,通过修改offset值，优化各项指标（一般地，提高offset，Resolution会上升，Peak width会减小，Intensity会下降）；

12) 当Intensity和Peak width的指标符合后，点击任一质谱图，点击

（Callibrate From Spectrum）, 出现MassCallibration options窗口，在Standard项选择PPGs POS

13) （

），查看Reference中各个离子的质荷比是否是59.050、175.133、500.380、616.464、906.673，不是的话Edit，各项参数都符合后，点击

；

14) 得到一个校准结果图，看所有的点是否在红线范围内，即Mass shift是否<=0.1，是的话，点击update，优化结束，不是的话，点击update，再重新打一次质谱；

15) 若手动校正不能达到指标，则按照4.3仪器自动校正的步骤进行校正后，再按照手动校正的步骤进行验证是否满足仪器指标的要求；

16) 达到指标后，更新数据，不保存方法；

17) 调整Scan rate为200 Da/s；

18) 用MCA方式采集50 Cycles ,右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表2 看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表2

Mass(Da)	Intensity(cps) at 200 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 1000 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 2000 Da/s (100 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(Da)
59.050	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
175.133	>=6.0×10⁶	>=6.0×10⁶	>=1.2×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1
500.380	>=4.4×10⁷	>=4.4×10⁷	>=9.0×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1
616.464	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
906.673	>=6.8×10⁷	>=6.8×10⁷	>=1.4×10⁸	0.6 to 0.8	<=0.1

19) 如果不符合表2的指标，通过调节IE1和offset去优化；

注：一般先调节offset值，达不到指标再调IE1，上述措施无效，则先自动校正

20) 达到指标后，更新数据，不保存方法；

21) 重复步骤13到15，以1000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集50Cycles；

22) 重复步骤13到15，以2000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集100Cycles。

4.1.2 Q3 Positive MS 手动校正

1）打开Q3 PosPPGs.dam文件；

2）调整Scan rate为10Da/s；

3）进PPG Positive 溶液(2.0×10-7M)以5μl/min 的流速；

4）用MCA方式采集10 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表3 看 Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表3

Mass(Da)	Intensity(cps) (10 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(amu)
59.050	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
175.133	>=1.2×10⁶	0.6 to 0.8	<=0.1
500.380	>=9.0×10⁶	0.6 to 0.8	<=0.1
616.464	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
906.673	>=1.4×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1

5）如果不符合表3的指标，通过调节offset参数去优化；

6）达到指标后，更新数据，不保存方法；

7）调整Scan rate为200 Da/s；

8）用MCA方式采集50 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表4 看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表4

Mass(Da)	Intensity(cps) at 200 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 1000 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 2000 Da/s (100 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(Da)
59.050	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
175.133	>=6.0×10⁶	>=6.0×10⁶	>=1.2×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1
500.380	>=4.4×10⁷	>=4.4×10⁷	>=9.0×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1
616.464	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
906.673	>=6.8×10⁷	>=6.8×10⁷	>=1.4×10⁸	0.6 to 0.8	<=0.1

注：一般建议先调节offset值，实在达不到指标再调IE3

9)如果不符合表4的指标，通过调节IE3和offset去优化；10）达到指标后，更新数据，不保存方法；

11）重复步骤8到10，以1000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集50Cycles；

12）重复步骤8到10，以2000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集100Cycles。

4.2负离子模式下PPG质量手动校正

4.2.1Q1 Nagative MS 校正

1）打开Q1 NegPPGs.dam文件；

2）调整Scan rate为10Da/s；

3）进PPG Nagative溶液(3.0×10-5M)，以10 μl/min的流速；

4）用MCA方式采集10 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表5看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表5

Mass(Da)	Intensity(cps) (10 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(amu)
44.998	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
411.259	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
585.385	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
933.636	>=1.0×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1

5）如果不符合表5的指标，通过调节offset参数去优化；

6）达到指标后，更新数据，不保存方法；

7）调整Scan rate为200 Da/s；

8）用MCA方式采集50 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表6 看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

表6

Mass(Da)	Intensity(cps) at 200 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 1000 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 2000 Da/s (100 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(Da)
44.998	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
411.259	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
585.385	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
933.636	>=4.0×10⁷	>=4.0×10⁷	>=8.0×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1

9)如果不符合表6的指标，通过调节IE3和offset去优化；

注：一般建议先调节offset值，实在达不到指标再调IE1

10）达到指标后，更新数据，不保存方法；

11）重复步骤8到10，以1000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集50Cycles；

12）重复步骤8到10，以2000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集100Cycles。

4.2.2Q3 Nagative MS 手动校正

1）打开Q3 NegPPGs.dam文件；

2）调整Scan rate为10Da/s；

3）进PPG Nagative溶液(3.0×10^-5M)，以10 μl/min的流速；

4）用MCA方式采集10 Cycles , 右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表7查看Intensity 、Peak width、Mass shift 等各项指标是否符合；

表7

Mass(Da)	Intensity(cps) (10 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(amu)
44.998	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
411.259	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
585.385	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
933.636	>=8.0×10⁶	0.6 to 0.8	<=0.1

5）如果不符合表7的指标，通过调节offset参数去优化；

6）达到指标后，更新数据，不保存方法；

7）调整Scan rate为200 Da/s；

8）用MCA方式采集50 Cycles ,右键Open file，点击任一质谱峰，右键list Data，切换到Calibration Peak list，按表8看Intensity 、Peak width、Mass shift 各项指标是否符合；

9)如果不符合表8的指标，通过调节IE3和offset去优化；

注：一般建议先调节offset值，实在达不到指标再调IE3

10）达到指标后，更新数据，不保存方法；

11）重复步骤8到10，以1000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集50Cycles；

表8

Mass(Da)	Intensity(cps) at 200 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 1000 Da/s (50 MCA scans)	Intensity(cps) at 2000 Da/s (100 MCA scans)	Peak width(Da)	Mass shift(Da)
44.998	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
411.259	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
585.385	n/a	n/a	n/a	0.6 to 0.8	<=0.1
933.636	>=4.0×10⁷	>=4.0×10⁷	>=8.0×10⁷	0.6 to 0.8	<=0.1

12）重复步骤8到10，以2000 Da/s的Scan rate用MCA方式采集100Cycles。

4.3 PPG质量自动校正

4.3.1 双击左边导航栏Navigation Bar 的Instrument Optimization进入自动调谐模式；

4.3.2 选择“Adjust instrument settings”，再点击“Next”，进入“Select a tuning mode”页面

图1

图 2

4.3.3 选择“Approved Tuning”模式，再点击“Next”，进入“Select the Scan modes”，并如图 1所示选择相匹配的“Tuning Solution”（PPG或者PPG 3000）、“Polarity”以及需要校正的参数，再点击“Next”后进入图 2所示的页面，在该页面修改喷雾电压、Gas1、注射泵的类型和流速等相关参数后，点击“Go”按钮，仪器开始进行自动校正，仪器在校正过程中的状态如图 3所示；

图3

4.3.4 校正自动完成后，会出现“Result Summary”的页面，点击“Finised”结束自动校正；

4.3.5 自动校正的结果以优化起始时间命名，默认保存在Project-“API Instrument”的“Data”文件夹下，可以进行查看；

4.3.6自动校正完成后，进入手动调谐模式，验证仪器状态是否符合各项指标；

5. 注意事项

5.1仪器正常运行时，禁止接触离子源，避免受到高温、高压的伤害；

5.2仪器停止工作后半小时内，禁止接触离子源，避免受到高温的伤害；