免疫
PCR(Immuno-
PCR)?是一种结合了抗原抗体反应的特异性和聚合链反应(
PCR)的极高灵敏性的检测技术。其工作原理主要包括两个主要步骤:抗原抗体反应和
PCR扩增。
抗原抗体反应- ?抗原包被?:首先,将待测抗原(如生血清白蛋白BSA)包被在微滴板孔中。
- ?抗体结合?:加入相应的特异抗体,使其与固相上的抗原结合,形成抗原抗体复合物。
- ?连接分子?:使用生物素作为连接分子,生物素可以与DNA分子结合,同时也能与抗原抗体复合物上的亲和素连接,从而将DNA分子间接吸附于固相?12。
PCR扩增- ?DNA吸附?:在第一步中吸附于固相的 PUC19质粒DNA在相应的引物存在下,通过PCR扩增,可以在几小时内放大数百万倍。
- ?产物检测?:PCR产物的多少与固相上抗原的量成正比,通过检测PCR产物的量来定量分析抗原?