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液质联用（LCMS）

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主题：【讨论】基质效应和回收率

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2007/9/27 16:33:00 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请教直接沉淀的空白基质加样怎么做

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cxh0204032

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2007/10/2 21:33:00 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

个人觉得这种做法是准确的。这两天分别碰到药大和上海药物所的研究生，又请教了一下，大抵上都是这样的做法。只是以不加内标和标准品的生物样品先处理后得到的提取液不吹干，加内标和标准品后再吹干。
前几天做了一下，感觉提取回收率都在100％左右，基质效应90％左右，进样器中放置后再重复，提取回收率变动了5％，基质效应变化范围10％左右，不知是否正常，呵呵。

在空白血浆处理后提取液中加入标准品和内标的浓度是否和做分子用的血浆样品处理中终浓度是相同的.

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青橄榄

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2007/10/5 10:31:00 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dickwang2008 发表:
谢谢楼主的奉献！我们大家做回收率的方式都不一样，其中好多资料书上介绍的就是不同。我们做回收率时，就是将按正常样品处理方法处理出的样品进样得到的浓度为分子；以不加内标和标准品的生物样品先处理吹干后再加内标和标准品，然后吹干溶解进样得到的峰面积为分母；这样二者相比就是回收率。对于基质效应，就是以上面的分母作为基质效应的分子，然后以纯溶液直接进样得到的峰面积为分母，这样二者相比就是基质效应。
不知道各位作回收率的方法和我们是否一样，大家可以发表一下自己的见解

看了这个做法，我觉得应该象这样做，平时我们没吹干，而是用空白得到的溶液配制标样溶液，总觉得配制不同浓度时会有些许差异，原来加入标样后再吹干就不存在了，谢谢版主，开了这样的讨论，文章也下了，还得慢慢消化

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toolmessage

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2007/10/5 17:16:00 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

马上就要做回收率了
大虾支招啊
谢谢了

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瓢虫

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2007/10/12 8:29:00 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 juju11 发表:
请教直接沉淀的空白基质加样怎么做

可以将沉淀后的上清液吹干后，用溶在溶剂的溶液复溶。

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dashunelva

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2007/10/12 9:10:00 16楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

支持一下!

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meimeichem

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2007/10/16 12:36:00 17楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我是用空白血浆加内标提取，分母是用流动相取代血浆，加内标。。。其他都一样的，唯一不同的是用流动相取代血浆，应该用水取代血浆，但是药物不溶解于水。

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sihai_1210

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2007/12/21 10:37:46 18楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这种做法实际上就是抵消基质的抑制效应,我们平时也这么做.

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isabel

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2007/12/26 1:07:45 19楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

基质效应问题

基质效应问题
基质效应问题一直是我们遇到的大问题，刚看到了，想和大家交流一下，我的几点建议是：
1）最好是优化前处理方案，从根本上解决基质效应问题。如果是液液萃取，改用提取效率更高的提取剂；如果SPE估计关系不大；如果蛋白沉淀，更高的沉淀或稀释倍数，一般不建议改用无机盐，但得根据实际需要。另外，牵涉灵敏度能否达到的问题。
2）优化色谱条件，一般的基质抑制主要是前沿峰里的混合物质，最好是检测物与前沿峰完全分离。当然了，可以增加一些提高信噪比的物质，这些需根据离子化加合的物质选择。也可以使用梯度洗脱，既可以减少前沿基质，又能提高信噪比。
3）当然了，有些仪器可以通过特殊的方法专门考察一下基质效应所引响的区域，从三通阀处用针泵恒速进样检测物，用液相进样含基质的空白基质处理液，检测会看到基质抑质的倒峰。
4）优化离子源参数，以实际响应的提高为标准。
6）对于内源性基质抑制就很难处理了，要一步步去寻找根源和减少抑制。

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Last edit by madprodigy