主题：【原创】酶标仪能快速大量检测土壤\食品\饲料等原料中的磷含量

核农学报》
Acta Agriculturae Nucleatae Sinica 起止页码：183-185国际标准刊号：ISSN 1000-8551国内统一刊号：CN 11-2265/S

酶标仪在稻米表观直链淀粉含量测定及突变体筛选中的应用朱小杨
[1] 沈圣泉[1] 陈文岳[2] 舒庆尧[1][1]浙江大学原子核农业科学研究所，浙江杭州310029 [2]杭州农业科学研究所，浙江杭州310008PDF全文

摘　要:探索了96孔全自动酶标仪(SpectraMax190，Sunnyvale，USA)在稻米表观直链淀粉含量(AAC)测定中的应用效果。实验以IR24、Iri371、Z413、KMD1、秀水11共5个品种为材料，以农业部部颁标准为参照，样本处理后不作定容稀释而直接在96孔酶标板上进行显色，测定OD值，根据标样获得的回归等式计算待测样本的AAC。结果表明，酶标法与国标法测得的精度无显著差异。利用这一体系，对1500余份协青早B的M3(收自M2单株)种子进行了AAC突变体筛选及后代跟踪研究，获得了1份中等AAC(16％左右)突变体ZXY16。该方法操作简便易行，据此可建立高通量稻米AAC测定体系。

关键词:酶标仪 稻米 性状表观 直链淀粉 含量测定 突变体筛选

分类号:　S511文献标识码：文章编号：相关文献:参考文献(11篇)　耦合文献(29篇)　　相关文献

jiankang123朋友询问如何用酶标仪测定BCA蛋白浓度，可以用图示一下吗?有知道的么?

原文由 ruojun 发表:
jiankang123朋友询问如何用酶标仪测定BCA蛋白浓度，可以用图示一下吗?有知道的么?

BCA蛋白质定量检测
在蛋白质的表达纯化，结构和功能的研究工作中，蛋白质的定量随处可见。但是，什么是理想的蛋白质定量方法？如何准确、快速的对蛋白质进行定量，对于不同的样本，如何选取相应的蛋白质定量试剂和方案？如何避免实验中引入的其它物质对蛋白质定量的干扰，PIERCE为这一切提供了可以信赖的解决方案。

BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐。其中MicroBCA产品可检测到0.5μg/ml的微量蛋白，是目前已知的最灵敏的蛋白质检测试剂之一。

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jiankang123朋友询问如何用酶标仪测定BCA蛋白浓度，可以用图示一下吗?有知道的么?

http://ustcers.com/blogs/shininglake/articles/category/21.aspx

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jiankang123朋友询问如何用酶标仪测定BCA蛋白浓度，可以用图示一下吗?有知道的么?

1.  根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.  完全溶解蛋白标准品，取10微升稀释至100微升，使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀
  释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

3.  将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的标准品孔中，加用于稀释标准品的溶液补足到20微升。

4.  加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加用于稀释标准品的溶液到20微升。

5.      各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置30分钟。

  注：也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应
  会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或延长孵育时间。
6.    测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出蛋白浓度。
 
常见问题：
1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。
  可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考下网页:
  http://www.beyotime.com/Compatibility Chart For BCA Kit.pdf
2. 是否每次测定时都需要做标准曲线？
  建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。 
 
使用本产品的文献：
1. R.-C. Wu, Z. Wang, M.-J. Liu, D.-F. Chen and X.-S. Yue，

β2-integrins mediate a novel form ofchemoresistance in cycloheximide-induced U937 apoptosis.
Cell. Mol. Life Sci. 2004,61(16):2071–2082.
注：本研究论文由清华大学发表，该杂志2003年的影响因子为4.995 (Impact factor: 4.995)。
 
2. Wu RC, Chen DF, Liu MJ, Wang Z.
Dual effects of cycloheximide on U937 apoptosis induced by its combination with VP-16.
Biol Pharm Bull. 2004 Jul;27(7):1075-80. (Impact factor: 1.317)
 
3. 刘军 丁劲 薛采芳 李英辉 宫卫东 赵亚 黄豫晓 带有蛋白转导域的靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的影响。中华肝脏病杂志2004年第6期第377页
 
4. Zhong-shu Liang , Kan Yang and Ben-mei Chen.

Cholesterol in U937 foam cells assayed in liquid chromatographic-mass spectrometry. 
Chin J Mod Med; 2004, 14(20): 51-56. 
 
5. Liu MJ, Wang Z, Li HX, Wu RC, Liu YZ, Wu QY.
Mitochondrial dysfunction as an early event in the process of apoptosis induced by woodfordin I in human leukemia K562 cells. 
Toxicol Appl Pharmacol. 2004 Jan 15;194(2):141-55. (Impact factor: 2.851)
 
6. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ.
A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres. 
Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7. (Impact factor:2.836)
 
7. Liu MJ, Yue PY, Wang Z, Wong RN.
Methyl protodioscin induces G2/M arrest and apoptosis in K562 cells with the hyperpolarization of mitochondria.

Cancer Lett. 2005, 224:229–241. (Impact factor: 2.614)

 
8. Liu MJ, Wang Z, Ju Y, Wong RN, Wu QY.
Diosgenin induces cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia K562 cells with the disruption of Ca2+ homeostasis.
Cancer Chemother Pharmacol. 2005 Jan;55(1):79-90.(Impact factor: 2.046)
 
9. Jin Ding, Jun Liu, Cai-Fang Xue, Ying-Hui Li, Ya Zhao, Jun Chen, Yu-Xiao Huang, Zhong-Xiang Liu.
TatPTD can introduce HBV targeted ribonuclease into hepatocytes.
World Chin J Digestol. 2005 april 15;13(8):958-962. 
 
10. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang.
Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine.
Toxicology Letters 159 (2005) 71–82. (Impact factor: 2.571)
 
11. Jin Ding, Jun Liu, Cai-Fang Xue, Ying-Hui Li, Ya Zhao, Jun Chen, Yu-Xiao Huang, Zhong-Xiang Liu
TatPTD can introduce HBV targeted ribonuclease into hepatocytes.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2005;13(8):958-962
 
12. Gao Jianmei, Wan Yanzhen, Han Jun, Wang Xiaofan, Chen Lan, Nie Kai, Zhou Wei, Dong Xiaoping.
Influence of the Numbers of Octapeptide Repeats within N2terminus of Recombinant Human PrP Proteins on the Protease Resistance af ter Interacting with Metal Ions and the Binding Abil ity with Tau Protein.
Chinese Journal of Virology. 21(5):376-83. 
 
13. Wang Yichao, Zou Quanming, Ren Jianmin, Liu Jian,Wang Xiaoqin.
Preparation and character of microspheres of Helicobacter pylori whole cell protein encapsulated by chitosan - alginate.
West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 2005,20(5):375-7. 
 
14. Zhao Y, Guan H, Liu SF, Wu RC, Wang Z. 
Overexpression of QM induces cell differentiation and mineralization in MC3T3-E1.
Biol Pharm Bull. 2005 Aug;28(8):1371-6. (Impact factor: 1.317)
 
15. Yi ZC, Liu YZ, Li HX, Yin Y, Zhuang FY, Fan YB, Wang Z. 
Tellimagrandin I enhances gap junctional communication and attenuates the tumor phenotype of human cervical carcinoma HeLa cells in vitro.
Cancer Lett. 2006 Oct 8;242(1):77-87. (Impact factor: 3.049)
 
16. Ma JF, Guo JK, Peng LW, Chen CY, Zhang LX.
Decrease of photosystem II photochemistry in Arabidopsis ppt1 mutant is dependent on leaf age. 
J Integr Plant Biol. 2006; 48(12), 1409-1414.
 
17. Wu ZQ, Li M, Chen J, Chi ZQ, Liu JG.
Involvement of cAMP/cAMP-dependent protein kinase signaling pathway in regulation of Na+,K+-ATPase upon activation of opioid receptors by morphine.
Mol Pharmacol. 2006 Mar;69(3):866-76. (Impact factor: 4.612)
 
18. Huang YY, Deng JY, Gu J, Zhang ZP, Maxwell A, Bi LJ, Chen YY, Zhou YF, Yu ZN, Zhang XE.
The key DNA-binding residues in the C-terminal domain of Mycobacterium tuberculosis DNA gyrase A subunit (GyrA).
Nucleic Acids Res. 2006;34(19):5650-9.(Impact factor: 7.552)
 
19. Wu ZQ, Chen J, Chi ZQ, Liu JG.
Involvement of dopamine system in regulation of Na+,K+-ATPase in the striatum upon activation of opioid receptors by morphine.
Mol Pharmacol. 2007 Feb;71(2):519-30. (Impact factor: 4.612)
 
20. Jun Hong, Dongmei Xua, Peijun Gong, Hanwen Suna, Li Dong, Side Yao.
Covalent binding of -chymotrypsin on the magnetic nanogels covered by amino groups.
Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic 45 (2007) 84–90. (Impact factor: 1.685)
 
21. Zong-Chun Yi, Hong Wang, Guang-Yao Zhang, Bing Xia.
Downregulation of connexin 43 in nasopharyngeal carcinoma cells is related to promoter methylation.
Oral Oncol. 2007 Feb 14; [Epub ahead of print] (Impact factor: 2.266)

是不是太专业了?俺怎么都看不明白?好象在云里雾里一样 俺水平太低哈~

原文由 xuelingqiang 发表:
是不是太专业了?俺怎么都看不明白?好象在云里雾里一样 俺水平太低哈~

你需要什么帮助可以联系我,或其他人,或在这发帖子

你需要什么帮助可以联系我,或其他人,或在这发帖子
好的,谢谢你哈~俺以后会经常来学习的~

有做过误差分析吗？变异系数多少？

原文由 heruihung 发表:
有做过误差分析吗？变异系数多少？

做过,与常规的磷测定方法如磷鉬胺比色法相似。