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主题：【原创】UPLC柱压突然上升到13000psi左右，怎办？

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wshx
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发表于：2007/08/23 22:54:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
前几天用的UPLC柱压突然上升到13000psi左右，检查过了，的确是柱子的问题，不知反冲行否？前一阵子是一个新来的研究生在做，用的时候流动相里加了2mM乙酸胺，但做完实验后这家伙急着回家总是只冲个20分钟就停泵，是否与这有关，不知各位有何良方？
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2007/8/24 0:00:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 szx0127 发表:
前几天用的UPLC柱压突然上升到13000psi左右，检查过了，的确是柱子的问题，不知反冲行否？前一阵子是一个新来的研究生在做，用的时候流动相里加了2mM乙酸胺，但做完实验后这家伙急着回家总是只冲个20分钟就停泵，是否与这有关，不知各位有何良方？


这柱子可以反冲，用100％的水相先冲的时间长些，把里面的盐给洗脱下来，然后再用有机相冲洗。但我觉得跟用缓冲盐没有多大联系，因为你的浓度本来就很低，影响不大
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i7788250u
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2007/8/26 22:07:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC柱子  不  能  反  冲  !!!
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Last edit by i7788250u
lixuejuan
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2007/8/26 23:27:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 szx0127 发表:
前几天用的UPLC柱压突然上升到13000psi左右，检查过了，的确是柱子的问题，不知反冲行否？前一阵子是一个新来的研究生在做，用的时候流动相里加了2mM乙酸胺，但做完实验后这家伙急着回家总是只冲个20分钟就停泵，是否与这有关，不知各位有何良方？

可以反充的，充的 时候可以适当提高柱温箱的温度，提高溶解度，乙酸氨是有这个毛病冲柱子哦不 充分就容易堵，我也遇到过
也可以把柱头卸下来超声一下都是可以的
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longly
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2007/8/27 15:08:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC柱是可以反冲的，还可以长期用纯水冲，不错的，但就是容易堵塞；我看你这个不是因为乙酸铵的原因，是因为别的原因才会堵的，而且一旦堵了，就很难恢复的，等着再花5千元吧！

早就该用保护柱，为时已晚！
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dickwang2008
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2007/8/30 10:20:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 i7788250u 发表:
UPLC柱子  不  能  反  冲  !!!


呵呵，我想问下你说的不能反冲的柱子，是1.7um粒径的吗？我们一直使用超高效液相相匹配的色谱柱，是可以反冲的！难道人家工程师也说错了？而且我们的柱子反冲还可以做完一个项目
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wshx
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2007/9/1 22:30:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这柱子可以反冲，用100％的水相先冲的时间长些，把里面的盐给洗脱下来，然后再用有机相冲洗。但我觉得跟用缓冲盐没有多大联系，因为你的浓度本来就很低，影响不大

我也觉得这么低浓度的盐影响不会太大，但C18的柱子再怎么也不应该用纯水冲吧，至少得加个5%的有机相
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xanderway
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2007/9/2 21:39:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC的柱子就是粒径小了，其他使用没大的区别，应该可以反冲，另外注意，UPLC柱前有个在线虑器，里面的滤芯是可以换的，看看是不是这里堵了。
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yaoyamin
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2007/9/27 16:14:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习学习，颇觉受用！觉得各位都是我的良师呀！
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rosesann007
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2007/10/7 0:34:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC因其粒径小，所以在使用时要多加小心。标准溶液最好过0.22um的滤膜，中药提取物要用SPE小柱纯化，而对于生物样品，则要经高转速离心后方可进样。这样可以最大限度的延长它的使用寿命。如果柱子压力过高，可反过来冲柱，用尽量大的流速，使堵在柱头的盐或内源性物质被冲出，最好使用梯度冲柱，但反冲不宜时间过长，且最好早发现，早行动，否则效果不明显。
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tiandejin
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2007/10/7 14:55:00 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱前再现过滤器有一个滤芯，色谱柱前头还有一个滤芯，这两个滤芯都是可以更换的，先换掉再现过滤器，不行的话在换掉柱前的，压力就会明显降低，但是柱前的滤芯频繁更换可能会使柱填料破损一部分，以致影响柱效。
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