主题：【第十四届原创】饮用水中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

项目名称：克百威、涕灭威              　

标准依据: 《饮用水中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》GB/T 23214-2008

验证日期：20**.**.**        　　　

 

1、方法依据

《饮用水中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》GB/T 23214-2008

2、方法原理

试样用1%乙酸乙腈溶液提取，经弗罗里硅土柱净化后，乙腈+甲苯（3+1）洗脱农药及相关化学品，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

3、实验室人员基本情况

表1  参加证实的人员基本情况

姓名	职务或职称	专  业	从事相关分析工作年限
***	***	***	***
***	***	***	***
***	***	***	***
***	***	***	***

4、仪器和设备

表2  仪器设备基本情况

仪器名称	规格型号	出厂编号	性能情况 （检定/校准）	备注
液相色谱-三重四极杆质谱联用仪	LCMS-8030	******	校准	/
以下空白

5、试剂和材料

表3  使用试剂、标液及溶剂基本情况

名称	生产厂家	规格/浓度	标准要求	是否符合
乙腈	默克	色谱纯	色谱纯	是
乙酸	科密欧	优级纯	优级纯	是
乙酸铵	风船	优级纯	优级纯	是
无水乙酸钠	风船	分析纯	分析纯	是
无水硫酸钠	风船	分析纯	分析纯	是
无水硫酸镁	风船	分析纯	分析纯	是
甲酸	科密欧	液相色谱纯	优级纯	是
甲苯	风船	色谱纯	优级纯	是
乙腈中涕灭威标准溶液	BePure	100ug/ml	/	/
甲醇中克百威标准溶液	BePure	100ug/ml	/	/

6、环境条件

表4  环境条件基本情况

验证日期	温度（℃）	湿度（%RH）	是否满足方法要求
2020.**.**	25	21	是
2020.**.**	25	21	是

7、样品

7.1样品采集的采集与保存

将取得的全部原始样品倒入洁净的聚四氟乙烯样桶内，密封，表明标记（样品标签），冷藏保存。

7.2样品的预处理

无

8、分析步骤

  8.1标准物质配制步骤

  8.1.1克百威中间液配制过程：用微量针取乙腈中克百威标准溶液（100ug/ml）200ul于2ml容量瓶中，用乙腈定容至刻度，此中间液浓度为10ug/ml。

    8.1.2涕灭威、克百威标准溶液系列配制过程：取6个2ml容量瓶，分别加入克百威中间液（10ug/ml）4ul、10ul、20ul、40ul、60ul、100ul，乙腈中涕灭威标准溶液（100ug/ml）4ul、10ul、20ul、40ul、60ul、100ul，用乙腈+水（3+2）定容至刻度，此标准溶液中克百威浓度分别为：0.02ug/ml、0.05ug/ml、0.1ug/ml、0.2ug/ml、0.3ug/ml、0.5ug/ml，涕灭威浓度分别为：0.2ug/ml、0.5ug/ml、1ug/ml、2ug/ml、3ug/ml、5ug/ml。

    8.2样品分析步骤

8.2.1样品提取及净化

移取25ml（精确至0.1ml）试样于100ml具塞离心管中，加入40ml1%乙酸乙腈溶液，在旋涡混合器上混匀2min，向具塞离心管中加入4g无水乙酸钠，再振荡一分钟，再向离心管中加入15g无水硫酸镁，振荡5分钟，4200r/min离心5分钟，准确移取20ml上清液至旋转蒸发瓶中，在40℃水浴中旋转浓缩至约2ml。在氨基净化柱中加入约2cm高无水硫酸钠，并将柱子放入下接鸡心瓶的固定架上。加样前先用5ml乙腈+甲苯（3+1）预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品提取液转移至净化柱上，并更新鸡心瓶进行接收，在净化柱上加50ml贮液器，用25ml乙腈+甲苯（3+1）洗脱，合并与鸡心瓶中，并在40℃水浴中旋转浓缩至约0.5ml，与35℃下氮气吹干，用乙腈+水（3+2）定容，经0.2um微孔滤膜过滤后供液相色谱-串联质谱分析。

8.2.2仪器分析条件

色谱柱：1.9μmC18，2.1×100mm；

流动相及梯度洗脱条件：

时间/min	流速/（ul/min）	流动相D（1%甲酸水）/%	流动相A（乙腈）/%
0.00	300	60	40
0.80	300	60	40
1.50	300	10	90
3.00	300	10	90
3.50	300	60	40

柱温：40℃；

进样量：5ul；

电离源模式：电喷雾离子化

电离源极性：正；

雾化气：氮气；

雾化气流量：2L/min；

离子喷雾电压：4.5kV；

干燥气流速：15L/min；

监测离子对：克百威，221.90/165.10、221.90/123.05；

涕灭威，213.55/89.25、213.55/151.55、208.10/116.00、208.10/89.10。

8.2.3样品的测定

按照8.2.2的仪器条件进行样品的测定。

9、结果计算

样品的结果计算

样品中被测组分的质量浓度Xi，按照公式(1)进行计算；

X=c×V1÷V2          （1）

式中:  X—样品中被测组分的质量浓度，ug/L；

      c—从标准曲线中得到的被测组分溶液浓度，ng/ml；

      V1—样品溶液定容体积，ml；

      V2—样品溶液所代表试样的体积，ml。

10、检出限验证

取样品（样品编号：******）25ml，加入克百威0.05ug，涕灭威0.50ug，按照8.2.1进行前处理及净化。重复7次上述实验，按照8.2.2的仪器条件进行上机分析，计算样品结果的标准偏差。

检出限按下式计算：         

MDL=t（n-1,0.99）×S             

式中：S—对同一样品的浓度测试的标准偏差；

      t—自由度为n-1，置信度为99%时t的分布（单侧），n为7次时，t=3.143；

      MDL—方法检出限。

表5 检出限验证结果

物质名称	平行1 (ug/L)	平行2 (ug/L)	平行3 (ug/L)	平行4 (ug/L)	平行5 (ug/L)	平行6 (ug/L)	平行7 (ug/L)	标准偏差S (ug/L)	MDL (ug/L)	标准中检出限 (ug/L)	是否 符合
克百威	1.71	1.58	1.65	1.65	1.61	1.58	1.99	0.144	0.453	1.31	是
涕灭威	16.8	14.1	13.8	17.8	14.0	12.9	13.7	1.82	5.72	26.1	是

11、精密度验证

取样品（样品编号：******）25ml，加入克百威0.25ug，涕灭威2.50ug，按照8.2.1进行前处理及净化。重复6次上述实验，按照8.2.2的仪器条件进行上机分析，计算样品结果的相对标准偏差。

表6 精密度验证结果

物质名称		克百威	涕灭威
测定结果 （ug/L）	1	7.38	77.0
	2	7.33	78.6
	3	7.31	67.8
	4	7.34	89.4
	5	7.72	82.9
	6	7.77	85.5
相对标准偏差RSD（%）		2.8	9.4
标准要求RSD（%）		/	/
是否符合		/	/

12、准确度验证

12.1样品低浓度加标

取样品（样品编号：******）25ml，加入克百威0.25ug，涕灭威2.50ug，此加标样品中含克百威：10ug/L，涕灭威：100ug/L。按照8.2.1进行前处理及净化，按照8.2.2的仪器条件进行上机分析，计算目标组分的回收率（%）。

表7 准确度验证结果

物质名称	克百威	涕灭威
测定结果（ug/L）	8.22	85.7
样品加标理论值（ug/L）	10.0	100
回收率（%）	82.2	85.7
标准要求回收率（%）	/	/
是否合格	/	/

12.2样品高浓度加标

取样品（样品编号：******）25ml，加入克百威0.75ug，涕灭威7.50ug，按照8.2.1进行前处理及净化，按照8.2.2的仪器条件进行上机分析，计算目标组分的回收率（%）。

表8 准确度验证结果

物质名称	克百威	涕灭威
测定结果（ug/L）	29.5	289
样品加标理论值（ug/L）	30.0	300
回收率（%）	98.3	96.3
标准要求回收率（%）	/	/
是否合格	/	/

验证过程中异常值的解释、更正或本标准中其他要求

无

14、方法验证结论

    经验证，本方法各项特性指标均符合《饮用水中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》GB/T 23214-2008的要求。本项目可在本实验室开展。

验证人：                            复核人：

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