a 提取方法
①谷类、豆类和种子类
将样品粉碎,通过420μm的标准网筛后,称取其10.0g,加入10mL水,放置2小时。
加入100mL丙酮,搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸,抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样操作,合并滤液于减压浓缩器中,在40℃以下浓缩至约30mL。
将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,合并洗涤液于分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷,按上述同样操作,合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶,以此洗液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并二洗涤液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去正己烷。
残留物中加入30mL正己烷,移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈, 用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈,按上述同样操作,重复二次,合并乙腈层于减压浓缩器中,40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
②水果和蔬菜
准确称取约1kg样品,必要时定量加入适量的水,搅碎混合均匀后,称取相当于20.0g样品的量。
加入100mL丙酮, 搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸,抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样方法操作,合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约30mL。
将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,合并洗涤液于分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷,按上述同样操作,合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并二洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。
b 净化方法
在内径15mm,长300mm的色谱管中注入5g悬浮在正己烷中的柱色谱用合成硅酸镁,其上面再装入约5g无水硫酸钠,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后,注入100mL乙醚:正己烷(3∶17)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去乙醚和正己烷。残留物中加入正己烷溶解,准确至2mL,此为试验溶液。
6.操作方法
a 定性试验
按下列操作条件进行试验,试验结果必须与标准品的一致。
操作条件
柱:内径0.25mm、长30m的石英毛细管,涂布0.25μm厚
气相色谱用甲基硅酮,老化。
柱温:在50℃保持1分钟,此后每分钟升温20℃。达到240℃后保持11分钟,再每分钟升温20℃,达到280℃后保持10分钟。
进样器温度:250℃
检测器温度:280℃
气体流量:以氦气为载气,调整流速使稗草丹约16分钟流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
按照与a 定性试验相同的操作条件,用
气相色谱--质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外,必要时用峰高法和峰面积法进行定量。