主题:【求助】请教标准曲线

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neau
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原文由 lyxiud 发表:
http://www.microbiohome.com/forum/dv_rss.asp?s=xhtml&boardid=17&id=2094&page=1&star=1&count=26
到这个网页看看。
利用EXCEL做标准曲线。
介绍很详细。


确实很详细!
felicia
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我认为手工制作标准的标准曲线一定应该是直线。

有人可能有异议,不错标准的反应曲线都应该是有延迟期、上升期和平台期的S型曲线,但那是反应曲线,而不是标准曲线。

标准曲线是为了定量浓度而做的,它本质上是以多个标准采样点回归出浓度反应曲线,再利用浓度反就曲线而求未知浓度。标准曲线本质是浓度反应曲线,浓度反应曲线标准S型是没有错。

但是标准曲线虽然是浓度反应曲线,但他是特殊的浓度反应曲线。如果制作标准曲线的标准浓度落在平台期,这本身就犯了原则性的错误,因此,说标准曲线是S型,我认为是不正确的。由于标准曲线只能取线性反应区,所以他应该是直线。

当然,有的反应并不是线性的,而是成指数的。因此其反应期曲线是指数的,并不是直线。但是如果是手工绘制标准曲线,是不可能绘制好曲线的,而绘制直线借助直尺就可以了,因此正确的应该使用对数等手段线性化后,绘制出直线标准曲线后使用。所以标准曲线还是应该是直线。

根据以上反应我们很容易得出物料平衡方程,K=[ES]/([E初]-[ES])*([S初]-[ES]),由此可以看出浓度曲线应该是二次曲线而非直线。但如果我们让[S初]远远过量,那么[S初]-[ES]就近似的等于[S初],方程可以简化为直线方程:

[E初]=[ES]/[S初]*K+[ES]

由此我们可以看出同样的反应,设计不同的体系,是可以将反应直线化的。这也就是为什么同样的项目,同样的方法,而有的是直线的,而有此是半对数直线的。这主要就是因为另一反应物浓度不同造成的。

由于现在试剂商品化,因此设计不受我们控制,而厂家并没有在反应设计中直线化(或者某些项目直线化结果不理想),造成标准曲线不成直线是可能的。这种情况我们不能想当然的画成直线,而要使用直线化方法,直线化后绘制。

其实在实际工作中,手工制作标准曲线最好的办法借用计算机拟合,试用各种拟合方法,取R值最好的一种绘制。
mbx17
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非常感谢,终于找到了,最近正在用,想学这个,呵呵
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