主题：【求助】10%中性甲醛固定标本和4％多聚甲醛固定区别

转贴自联合病理网，介绍的比较详细。

病理组织学常用制备技术
 
组织的固定

（一）  固定的概念

应用各种方法使病理标本尽量保持其离体前状态的过程称为固定（fixation）。
病理标本（样本）离体后，由于微环境的变化将发生自溶和（或）腐败，使其结构破坏。固定的目的和机制是：①使蛋白质凝固，终止或减少分解酶的作用，防止自溶，保存组织、细胞的离体前结构状态，包括保存组织或细胞的抗原性，使抗原不失活，不发生弥散。②保存组织、细胞内的蛋白质、脂肪、糖原、某些维生素及病理性蓄积物，维持病变的特异性特征。③使上述物质转为不溶解状态，防止和尽量减少制片过程中人为的溶解和丢失。④起助染作用。
固定方法有：①物理学方法，如低温冷冻，干冰（dry ice，即固态无水碳酸）冰冻真空脱水，石蜡渗入法。②化学方法，采用各种化学溶液作固定液，使组织细胞进入固定状态。这是国内最常用的方法。

固定应在标本离体后尽快进行，小标本可在取材后直接放入固定液内，大标本应在手术结束前或结束后迅速放入固定液内。

固定液与标本的比例不得少于标本体积得5倍。有特殊要求者应事先选定相应得固定液，如欲查糖原，应选择无水乙醇作固定液等。

固定得时间应适当，微小标本（如胃粘膜等）2～4h即可，大标本应置放12～24h，但亦不要过久，以免影响抗原性，造成免疫组化操作中得困难。

（二）      常用固定液及其配制

固定液分单纯固定液和混合固定液。

1甲醛（formaldehyde）

  是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formalin）。用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。

经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。

2 乙醇

无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。

3 中性甲醛液（混合固定液）

甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4•H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。

4 AF液（混合固定液）

95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。

此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。

长知识了，谢谢!

够专业的哟！

那多聚甲醛呢?

我认为很有可能两者本质无太大差别
以下是网上搜到的关于多聚甲醛固定液配置方法和解聚方法
碱解法是另一种多聚甲醛解聚方法，它利用碱性条件将多聚甲醛分解成低分子量单体或寡聚体。具体来说，碱解法通常采用以下条件：
1. 碱性条件：通常使用氢氧化钠、氢氧化钾或胺类碱作为催化剂，在室温下进行反应。
2. 时间：反应时间取决于所需产物的种类和质量。通常，反应时间在几小时到数十小时之间。
3. 水含量：由于多聚甲醛对水敏感，因此在进行碱解反应时需要控制水含量。一般来说，水含量不超过10%。

要配制1 L的4%多聚甲醛，在通风柜中，将800 mL的1X PBS加入玻璃烧杯，边搅拌边加热至约60℃，注意不能让溶液沸腾。

往热PBS溶液中加入40g多聚甲醛粉末。

多聚甲醛粉末可能不会立即溶解，可通过滴入1N NaOH搅拌逐步提高pH值，直至多聚甲醛粉末完全溶解。

待溶液冷却，过滤溶液，用PBS调节溶液体积至1L。

检查pH值，用稀盐酸调节pH值至6.9左右。

可以发现这两者有很多相似之处 。 可能多聚甲醛固定液与甲醛固定液无太大差别，主要成分相同。（以上仅为个人观点和网络资料）