主题：【转帖】食品中BHT 和BHA 比色法测定

第三篇  比色法
12  原理
样品通过水蒸气蒸馏，使BHT分离，用甲醇吸收，遇邻联二茴香胺与亚硝酸钠

溶液生成橙红色，用三氯甲烷提取，与标准比较定量。

13  试剂
13.1  无水氯化钙。
13.2  甲醇。
13.3  三氯甲烷。
13.4  甲醇（50%）。
13.5  亚硝酸钠溶液（3g/L）：避光保存。
13.6  邻联二茴香胺溶液：称取 125 mg 邻联二茴香胺于 50 mL 棕色容量瓶中，加25 mL 甲醇，振摇使全部溶解，加 50 mg 活性炭，振摇 5 min 过滤，取 20 mL 滤液，置于另一 50 mL 棕色容量瓶中，加盐酸（1＋11）至刻度。临用时现配并避光保存。
13.7  BHT标准溶液：准确称取 0.050 g BHT，用少量甲醇溶解，移入 100 mL 棕色容量瓶中，并稀释至刻度，避光保存。此溶液每毫升相当于 0.5 mg BHT。
13.8  BHT标准使用液：临用时吸取 1.0 mL BHT标准溶液，置于 50 mL 棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，避光保存。此溶液每毫升相当于 10.0 μg BHT。
14  仪器
14.1  水蒸气蒸馏装置。
14.2  甘油浴。
14.3  分光光度计。
15  分析步骤
15.1  样品处理
称取 2.00～5.00 g 样品（约含 0.4 mg BHT）于 100 mL 蒸馏瓶中，加 16 g无水氯化钙粉末及 10 mL 水，当甘油浴温度达到165℃恒温时，将蒸馏瓶浸入甘油浴中，连接好水蒸气发生装置及冷凝管，冷凝管下端浸入盛有 50 mL 甲醇的 200 mL 容量瓶中，进行蒸馏，蒸馏速度每分钟 1.5～2 mL，在 50～60 min 内收集约 100 mL 馏出液（连同原盛有的甲醇共约 150 mL，蒸气压不可太高，以免油滴带出），以温热的甲醇分次洗涤冷凝管，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度。
15.2  测定
准确吸取 25 mL 上述处理后的样品溶液，移入用黑纸（布）包扎的 100 mL 分液漏斗中，另准确吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL BHT标准使用液（相当于0、10、20、30、40、50 Šμg BHT），分别置于黑纸（布）包扎的 60 mL 分液漏斗，加入甲醇（50%）至 25 mL。分别加入 5 mL邻联二茴香胺溶液，混匀，再各加 2 mL亚硝酸钠溶液（3 g/L），振摇 1 min，放置 10 min，再各加 10 mL 三氯甲烷，剧烈振摇 1 min，静置 3 min 后，将三氯甲烷层分入黑纸（布）包扎的 10 mL 比色管中，管中预先放入 2 mL甲醇，混匀。用 1 cm比色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长 520 nm 处测吸光度，绘制标准曲线比较。
16  计算

                        m5×1000

　　　　　　　　X=---------------------------------------………………………  (4)

                      V2

                m5×-------×1000×1000

                      V1

式中：X—样品中BHT的含量，g/kg；

　　　m6—测定用样液中BHT的质量，μg；

　　　m5—样品质量，g；

　　　V1—蒸馏后样液总体积，mL；

　　　V2—测定用吸取样液的体积，mL。

    结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。

17  允许差
  相对相差≤10% -----------------------------------------------------------------------------------------------



    附加说明：

    本标准由卫生部卫生监督司提出

    本标准第一篇由江苏省卫生防疫站负责起草,第二篇由卫生部食品卫生监督检

验所、武汉市卫生防疫站、邯郸市卫生防疫站负责起草,第三篇由上海市卫生防

疫站负责起草。

    本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。