主题：【资料】关于用气相色谱法检测BHA，BHT

有机会试一下，另外有两个问题要请教一下：
1.如果含量较低，直接提取法能达到测试要求吗？
2.直接提取时有一部分油脂会溶解在甲醇中，这样对色谱柱有影响吗？

气相色谱法检测食用油脂中BHA、BHT样品前处理方法研究
中国热带医学杂志 作者：林春晓 ，付斌 ，叶泽群 ，文素娟 ，张尼芳
为了有效地监测食品中食用油脂抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚（BHA）、2，6-二叔丁基羟基甲酚（BHT）的浓度，探讨高效的提取和净化前处理方法，本文在食用油脂试样中加入BHA、BHT，并通过两种不同前处理方法，比较其测定的有效性。
1 材料和方法
1.1 仪器 ①惠普5890气相色谱仪、FID检测器、浙江大学N-2000双通道色谱工作站。②蒸发器（容积200ml）。③层析柱:1cm×30cm玻璃柱、带活塞。④气相色谱柱:柱长2.0m内径3mm不锈钢柱、内装涂有10%QF-1（m/m）的Gas chromq（80～100目）担体。
1.2 试剂 硅胶:60～80目，于120℃活化性放干燥器备用;弗罗里矽土（Florisil）:60～80目，于120℃活化性放干燥器中备用;BHA、BHT混合标准液（A法）:准确称取BHA、BHT各0.1000g混合后用乙醇溶解，定容至100ml，此溶液分别为每毫升含1.0mg BHA、BHT，置冰箱贮藏应用时吸取原液4ml于100ml容量瓶中，用乙醇定容至100ml，此容液分别为每毫升含0.040mg BHA、BHT，置冰箱中贮藏;BHA、BHT混合标准液（B法）:方法同上（溶剂改用二硫化碳）。
1.3 操作方法
1.3.1 样品前处理方法（A） 称取均匀样品2.00g置于10ml具塞比色管，用4、3、3ml乙醇分次提取，合并提取液，用滤纸过滤提取液（除去溶剂中剩余油脂），进行气相色谱分析。
1.3.2 样品前处理方法（B） 层析柱的制备:于层析柱底部加入少量玻璃棉，少量无水硫酸钠，将硅胶-弗罗里矽土（6+4）共10g，用石油醚湿法混合装柱，柱顶部再加入少量无水硫酸钠。试样的制备:称取混合均匀样品2.00g放入50ml烧杯中，加30ml石油醚溶解转到层析柱上，再用10ml石油醚分数次洗涤烧杯并转移到层析柱，用100ml二氯甲烷分5次淋洗，合并淋洗液，浓缩近干，用二硫化碳定容至2ml，进行气相色谱分析。
1.3.3 气相色谱检测条件 色谱柱长2.0m，内径3mm，不锈钢柱，内装涂有10%QF-1（m/m）的Gas chromQ（80～100目）担体，柱温140℃，进样口、检测器温度200℃;载气:氮气（N 2 ）流速40ml/min，氢气（H 2 ）40ml/min，空气450ml/min，进样体积3μl。
2 结果
2.1 曲线线性关系实验 以A、B两法的标准贮备液分别用乙醇、二硫化碳配制成两组标准系列，其浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/ml;进样3μl进行气相色谱分析。用峰高与剂量进行线性回归，BHA、BHT的相关系数r均大于0.999，表明两种溶剂配制的标准系列，其BHA、BHT各自标准曲线线性关系数良好（见表1）。表1 BHA、BHT标准曲线回归方程及相关系数（略）

从图1、图2（略）可见两种溶剂的BHA、BHT标准在本色谱条件下，分离效果好，检测成分出峰保留时间在4.5～7.5min之间，能消除溶剂对样品中其他成份的干扰。
2.2 检测限测定 以A.B两法的标准贮备液分别用乙醇、二硫化碳配制成一低浓度（0.02mg/ml）BHA、BHT混合标准液，进行气相气谱测定，连续测定7次，以3倍的浓度标准差作为方法的最低检测限，结果见表2。表2 BHA、BHT检测限的测定（领略）
2.3 精密度测定 取一定量的BHA、BHT标准与一份样品混合制成模拟样品，以两种不同的前处理方法，进行样品前处理，各连续测定10次计算其点内相对标准偏差，其标准偏差均小于6.3%（见表3），表明 方法的精密度良好。表3 BHA、BHT检测方法精密度测定（略）
　　2.4 回收率测定 将食用油脂与一定量的BHA、BHT抗氧化剂混合，制成高、中、低3个浓度加标样品，每个浓度取10个平行样品，样品经A、B两种前处理方法处理，分离提取后，应用气相色谱仪分析测得平均回收率在80%～98%之间，回收效果良好（见表4）。经t检验，两种方法测得的回收率值差异无显著性（P<0.05）。表4 BHA、BHT检测方法回收率实验（略）
　　3 讨论
    3.1 本文研究了检测油脂抗氧剂BHA、BHT的柱层析和乙醇提取两种前处理方法，前者为国标方法，后者为我们按照标准方法制定原则进行研究制定的方法。通过对两种方法比较，其相对标准差小于6.3%，回收率在80%～98%之间，检出限在1.1～6.9μg之间，说明两种方法均符合要求。且两种方法的测定结果接近于理论值，有显著相关性（P<0.05），对样品分析结果，也有较高的相关性（P<0.05），表明两种方法可以相互代替。
    3.2 国标方法中柱层析法前处理过程比较复杂，挥干二硫化碳后还会有少量的油脂残留，会对检验结果及分析柱的寿命有影响，而且需要较长的分析时间和大量溶剂，造成费用大，也污染环境。而乙醇提取法检测则仅需要10ml升乙醇，分3次提取即可，快速又节省试剂。虽然乙醇提取法存在溶剂拖尾现象，会造成基线抬升，但由于BHA、BHT两者的出峰时间在4.5～6.5min之间，通过积分计算，对样品结果真值影响不大。而且日常工作乙醇提取法较为方便，样品提取 液经滤纸过滤后，杂质少，在色谱分析中极少杂质峰出现，有利于保护色谱柱和延长其使用期限，乙醇提取法优于柱层析法，但两种方法可以相互代替。
　　参考文献:
   
　　［1］线引林.生物材料中有毒物质分析方法手册［M］.北京:人民卫生出版社，1994，1～2.
    ［2］（日本）食品卫生协会.食品卫生检验手册食品添加剂检验分册［M］.天津:科技翻译出版公司，1993，31～37.
    ［3］杨惠芬，李明元，沈文.食品卫生理化检验标准手册［M］.北京:中国标准出版社出版，1998，362～369.
［4］卫生部.食品卫生检验方法部分（一）［M］.北京:中国标准出版社，2004，241～250.
    ［5］王文风，马秋丽.气相色谱检测香口胶中BHA、BHT［J］.中国公共卫生，1994，3:128.
　　作者单位:深圳市宝安区疾病预防控制中心，广东深圳 518101.
   

动植物油脂 丁基羟基苯甲醚 BHA 丁基羟基甲苯 BHT 气相色谱法
动植物油脂 丁基羟基苯甲醚 BHA 丁基羟基甲苯 BHT [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱法[/url]

原文由 wangboxzzjs 发表:
有机会试一下，另外有两个问题要请教一下：
1.如果含量较低，直接提取法能达到测试要求吗？
2.直接提取时有一部分油脂会溶解在甲醇中，这样对色谱柱有影响吗？

按标准的方法，含量较低时采用加大取样量的办法。
用甲醇溶剂来溶解一定会有部分的油脂溶解，只能采取牺牲色谱柱的办法了

果然是大虾啊,资料太好了!对于作批样的我简直太救命了,出门闲逛了几小时回来,问题就解决了,样品直接以甲醇或乙醇提取,简单得很,多谢高招!多谢!!多谢!!!

太好了！一直在找处理样品这方面的方法，今天终于找到了！而且资料很全面，关心的问题讲得很清楚，样品用甲醇直接提取,批量检测简单方便适用，省了很多东西，真的太好了，谢谢楼主！！！

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