液相色谱分析特例(一)—与甲醇反应的样品(上)
一客户拿来一样品,结构式见下,粗看也没什么特别,用户也没交代什么特殊情况,我想这种样品很简单,让学生帮我做,而且以前也做了同样的样品。
化学结构式:
色谱条件:
Agilent 1100 DAD检测器,自动进样器,Inertsil ODS-3 150*4.6mm,流速1.0ml/min,波长241nm,流动相甲醇:水=82:18,样品用甲醇溶解,进样量2ul。
仪器平衡后,配好样品,启动程序自动运行,第一针还行,但基线不是很稳定,于是继续进样3针,好的话一般就没问题了。不过第二针出现四个峰,第三针出现较明显的三个峰,奇怪,这是什么原因,当第四针时跟第三针又没什么区别了。按理讲即使第一针不稳定,中间连续图谱也不应该出现多个色谱峰。我打开DAD看了不同图谱的光谱图,发现第一针和第四针的主峰的DAD图不一致,而第一图变化的主峰随着时间的延长不断减少,最终变成一个小杂质。
(四个光谱图)
这些图谱明显显示,样品溶解后在不断的变化,其中最大可能是与甲醇发生了化学反应,随着反应的不断进行,最终变成了另外一个化合物,说实在的也非常有意思。分子上的三个醛基估计是反应的部位,从不同图谱的次序看,三个醛基都会反应,反应1-2个醛基是中间的不稳定态,最后三个醛基反应完,保留时间处于最后。样品又稳定了,如果谁用甲醇配,放置了一段时间(看上面实际时间大概1小时就ok了),再测,也非常好,而实际已经发生了巨变。
与甲醇反应这么快,我极少遇到,而且是产生序列反应,一般能与流动相反应的样品大概在1-2%左右,因此分析者有时要注意,一些特特殊样品的特殊情况。
下篇我们讨论改成乙腈作为流动相和溶剂的区别。
(四个色谱图)。
液相色谱分析特例(一)—与甲醇反应的样品(下)