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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【原创】容易忽视的问题--关于吸光度和浓度的切换问题？？？

浏览0 回复16 电梯直达
初学者&九点虎
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发表于：2008/07/21 22:12:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天突然发现，在测定样品时，吸光度和浓度在切换的过程中存在一点点小问题。（我用的是老仪器7230，类似721那样的仪器，带工作站的仪器估计没这个问题）
    举个简单的例子说明，比如样品吸光度为0.425，当你切换成浓度时，其对应浓度为1.968，但我天做了一个，吸光度为0.425，浓度为2.012，后来我发现，2.012对应的吸光度为0.426，也就是说，在你切换的一瞬间，吸光度变化了0.001。
    追究其原因，我觉得有一下三种可能：
    1 仪器瞬间发生波动引起的吸光度变换
    2 仪器的几下基线漂移引起的吸光度变化
    3 溶液的性质发生了微小的变化
  没准还有别的情况，欢迎大家一起讨论。
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阿du
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2008/7/21 22:15:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仪器测定的波动还是有的，可以测几次取平均值计算。
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小鸟飞翔
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2008/7/21 22:19:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
会不会是换算，小数位取舍的问题？
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初学者&九点虎
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2008/7/21 22:23:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 duliuhui 发表:
仪器测定的波动还是有的，可以测几次取平均值计算。

只能这样了，我们一般是做平行试验的
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初学者&九点虎
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2008/7/21 22:23:21 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tonyding 发表:
会不会是换算，小数位取舍的问题？

不是，就是吸光度发生了变化
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夕阳
anping
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2008/7/22 7:40:54 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhouyuhu 发表:
今天突然发现，在测定样品时，吸光度和浓度在切换的过程中存在一点点小问题。（我用的是老仪器7230，类似721那样的仪器，带工作站的仪器估计没这个问题）
    举个简单的例子说明，比如样品吸光度为0.425，当你切换成浓度时，其对应浓度为1.968，但我天做了一个，吸光度为0.425，浓度为2.012，后来我发现，2.012对应的吸光度为0.426，也就是说，在你切换的一瞬间，吸光度变化了0.001。
    追究其原因，我觉得有一下三种可能：
    1 仪器瞬间发生波动引起的吸光度变换
    2 仪器的几下基线漂移引起的吸光度变化
    3 溶液的性质发生了微小的变化
  没准还有别的情况，欢迎大家一起讨论。


这种现象就是紫外可见分光光度计的特点，也可以说是弱点。
根据朗伯比尔定律，当通过率变化1％时，吸光度相应变化0.0044Abs，即：
Abs=Log100/99=0.0044。
那么楼主测量的吸光值变化了0.001Abs，其透过率仅仅变化了0.3%。
对仪器而言不要说国产仪器，就是进口仪器，0.3%透过率的变化也是很正常的，所以说紫外可见分光光度计灵敏度不高的原因也就是在此。
顺便说一句，象楼主所测的样品，如果可能的话（有荧光物质）可以改用荧光分光光度计来测。否则要采用其他测试手段了，因为在紫外上测，说句行话，“动态范围”太窄了。
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Last edit by anping
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2008/7/22 9:40:40 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
肯定是有变化的！！！每次实验的比色皿架落的位置是不可能一样的！
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活到九十 学到一百
wangboxzzjs
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2008/7/22 11:02:03 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种变化是可以接受的，我觉得不是什么大问题！
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tonyding
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2008/7/22 11:16:45 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangboxzzjs 发表:
这种变化是可以接受的，我觉得不是什么大问题！


0.001/0.425=2.35‰
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初学者&九点虎
zhouyuhu
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2008/7/22 18:34:35 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangboxzzjs 发表:
这种变化是可以接受的，我觉得不是什么大问题！

可以接受，但问题总是存在的
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S K
hhy78
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2008/7/23 16:33:19 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仪器的精密度确定了其测试，变化只能说尽量减小，吸光度变化0.001 以内还能接受，超过了可能就要找问题了。
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