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液相色谱（LC）

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主题：【求助】ELSD测皂苷类含量

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amypengying

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发表于：2008/08/25 16:13:39 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

第一次接触HPLC-ELSD，现打算做皂苷类含量测定，请问需要注意什么？氮气流速、气压条件如何定的？诸位多帮忙，急啊

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2008/8/25 16:56:36 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

N2最好0.999以上,这个要求没有气相那么高,注意温度的设置不要超出使用范围,ELSD的灵敏度与温度有很大的关系,并不是温度越高灵敏越高,反而是相反的.温度越高样品被蒸发的越多,被检测器捕获到的越少.注意流动相的出口,常关注有没有动出来.其它按说明书操作就行了.

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amypengying

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2008/8/26 10:41:33 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

温度是指漂移管温度吗？请问皂苷类一般设为多少?还有载气流速及流速，在操作说明中有吗，还是自己设？期待解惑

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nnsss

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2008/8/26 10:59:22 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 amypengying 发表:
第一次接触HPLC-ELSD，现打算做皂苷类含量测定，请问需要注意什么？氮气流速、气压条件如何定的？诸位多帮忙，急啊

各家仪器都有一定的压力规定,雾化温度一般室温,蒸发温度要看所选溶剂特性,

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2008/8/30 15:28:58 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

已经开始做了，但发现和HPLC-UV时差别很大，峰少了很多。按理说皂苷类是在一百多度应该不会挥发的呀，怎么会这样勒？？？有谁能帮帮忙啊？

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2008/8/30 17:52:23 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 amypengying 发表:
温度是指漂移管温度吗？请问皂苷类一般设为多少?还有载气流速及流速，在操作说明中有吗，还是自己设？期待解惑

一般从６０度开始摸索，载气流速一般为３．０,流动相跟其它色谱方法一样，我没做过皂苷类的，所以不知道流动相的组成，要求都是可挥发物，不能有无机物．操作说明中一般会显示最高使用温度，太高会把漂移烧坏了．条件都是自己忙摸出来的，不要心急，多查一些资料．

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2008/8/30 17:53:50 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 amypengying 发表:
已经开始做了，但发现和HPLC-UV时差别很大，峰少了很多。按理说皂苷类是在一百多度应该不会挥发的呀，怎么会这样勒？？？有谁能帮帮忙啊？

ＥＬＳＤ检测的是非紫外吸收的物质，所以跟紫外吸收有很大差别．
ELSD原理
恒定流速的色谱仪（高效液相、逆流色谱、高效毛细管电泳等）洗脱液进入检测器后，首先被高压气流雾化，雾化形成的小液滴进入蒸发室(漂移管，drift tube)，流动相及低沸点的组分被蒸发，剩下高沸点组分的小液滴进入散射池，光束穿过散射池时被散射，散射光被光电管接收形成电信号，电信号通过放大电路、模数转换电路、计算机成为色谱工作站的数字信号——色谱图。

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Last edit by xky0230699