原文由 z860809 发表:
实验方法:
1.藏红花素的检测分析:
定性检测:600~200nm扫描,在440nm有特征吸收峰
定量检测:制作标准曲线,取一定量的样品,溶于水后,测定A440,然后由标准曲线得出藏红花素的含量。
2.在不同乙醇浓度、不同温度、不同固液比、不同提取时间下提取,测定提取量,通过正交试验得出最佳提取条件
试验编号 提取温度(℃)乙醇浓度(%)固液比提取时间(h)A440提取率(μg/g)
1 50 70 1:12 0.5
2 50 80 1:15 1
3 50 90 1:18 1.5
4 60 70 1:15 1.5
5 60 80 1:18 0.5
6 60 90 1:12 1
7 70 70 1:18 1
8 70 80 1:12 1.5
9 70 90 1:18 0.5
上图是需要完成A440处吸光度值的测定,以及求算出提取率(μg/g)
我就是不懂怎样求提取率,和绘制标准曲线。
请各位大侠帮帮我,我目前只算了试验9得到的样品溶液稀释2000倍后测得的A440=0.321
和通过跑薄层后得到纯度更高的A440=0.483
我想知道怎样求得标准曲线和提取率。
各位大侠能帮小弟求出来吗。。附件里更详细点。
原文由 z860809 发表:
但是我现在只有藏红花素处理后得到的样品,这样的话如何去绘制标准曲线呢?
下面是我实验过程。很想请各位大侠模拟一下试验1-8的数据(大概范围也行)。。。。A440值和提取率。。。
栀子果实粉末20g用80ml 95%乙醇进行索式回流提取滤去不溶物将滤液收集起来放置烧杯中待用。
将滤液放入旋转蒸发器中进行蒸发,5min后得到约10ml栀子黄色素溶液。
从10ml浓缩的栀子黄色素溶液中取1ml进行稀释,先稀释2000倍,然后进行分光光度计测量溶液中栀子苷和藏红花素的吸光值A238和A440,测量结果得到A238栀子苷吸光值为0.770, A440藏红花素的吸光值为0.321 , A238和A440的比值为2.399,故其比值大于2可以得知溶液中栀子苷含量远大于藏红花素含量,接下来实验中进行栀子苷和藏红花素的分离即可得到高纯度的藏红花素.
配置展开剂氯仿:无水乙醇=2:1,跑完薄层后用小刀刮下点样点处未动的
点(跑动的点为栀子苷色素),刮下后加5ML蒸馏水进行离心取上清液,将上清液进行紫外分光光度计检测,测量出的A238 为0.255,A440为0.523,故其比值为0.488小于0.7,且与之前比值2.399相比有了大幅度下降,证明硅胶吸附试验成功洗脱了大量栀子苷,收集到了纯度较高的藏红花素