主题：【求助】关于药典附录紫外-可见分光光度法中对溶剂的要求的讨论

仪器的良好测量线性范围的要求。
对于双光束的仪器扣除可能容易些，单光束的仪器矫正能力要弱于双光束的仪器，即使是双光束的仪器，矫正也有极限。
你测定的值已经远远超出测量线性范围，估计要稀释10倍后再看看结果。

太感谢沙发的关于第一个问题的解答了，非常正确！
但第二个问题还是有疑问，吸光度并没有超出线性范围，吸光度为1以下（上图中画的有点问题），具体数值忘了，反正不大于1.但测定波长附近也有锯齿状波动。这个波动的原因是什么？可能不是混悬颗粒的影响，因为供试液是澄清的。

怎么用手绘制啊？不带扫描打印吗？

你的溶液太浓了，吸光度饱和了所以200到250NM的测试结果应该是无效的。稀释下或者换到5MM的器皿里再试试。

原文由 chaifayong(chaifayong) 发表:
第一个问题：为什么对溶剂有这个要求？并且在不同的波段有不同的要求？既然有溶剂空白，甚或试剂空白、试样空白，即使有吸收也不是扣除了吗？
第二个问题：是专项问题，请见莪术药材检查项下吸光度：242nm下不得低于0.65，以氯仿为溶剂。在检验时出的现象是：1、在检查氯仿是否合格时，首先以空气为空白，检查氯仿在200-300nm波段下的吸光度：在200-250nm左右下，吸光度严重地大，达3-4左右；即使在250-300nm，也大于药典附录要求的0.1。见图氯仿吸收图。
以氯仿为空白，测供试液的吸收时，发现，在200-300nm，吸光度不大于1；且200-250nm，吸收线有严重锯齿波纹，且有尖峰；在242nm，莪术项下要求值，虽有锯齿波纹，但可看出有较其他波长处大的吸收；250-300nm，吸收线较平滑。见图溶液吸收图。

附录是最新的药典中紫外可见分光光度计对溶剂的要求。

版主附录：
化合物名称 极性 粘度 沸点 吸收波长
i-pentane(异戊烷) 0 - 30 -
n-pentane(正戊烷) 0 0.23 36 210
Petroleum ether(石油醚) 0.01 0.3 30～60 210
Hexane(己烷) 0.06 0.33 69 210
Cyclohexane(环己烷) 0.1 1 81 210
Isooctane(异辛烷) 0.1 0.53 99 210
Trifluoroacetic acid(三氟乙酸) 0.1 - 72 -
Trimethylpentane(三甲基戊烷) 0.1 0.47 99 215
Cyclopentane(环戊烷)  0.2 0.47 49 210
n-heptane(庚烷) 0.2 0.41 98 200
Butyl chloride(丁基氯; 丁酰氯) 1 0.46 78 220
Trichloroethylene(三氯乙烯; 乙炔化三氯) 1 0.57 87 273
Carbon tetrachloride(四氯化碳) 1.6 0.97 77 265
Trichlorotrifluoroethane(三氯三氟代乙烷) 1.9 0.71 48 231
i-propyl ether(丙基醚; 丙醚) 2.4 0.37 68 220
Toluene(甲苯) 2.4 0.59 111 285
p-xylene(对二甲苯) 2.5 0.65 138 290
Chlorobenzene(氯苯) 2.7 0.8 132 -
o-dichlorobenzene(邻二氯苯) 2.7 1.33 180 295
Ethyl ether(二乙醚; 醚) 2.9 0.23 35 220
Benzene(苯) 3 0.65 80 280
Isobutyl alcohol(异丁醇) 3 4.7 108 220
Methylene chloride(二氯甲烷) 3.4 0.44 240 245
Ethylene dichloride(二氯化乙烯) 3.5 0.78 84 228
n-butanol(正丁醇) 3.7 2.95 117 210
n-butyl acetate(醋酸丁酯；乙酸丁酯) 4 - 126 254
n-propanol(丙醇) 4 2.27 98 210
Methyl isobutyl ketone(甲基异丁酮) 4.2 - 119 330
Tetrahydrofuran(四氢呋喃) 4.2 0.55 66 220
Ethyl acetate（乙酸乙酯） 4.30  0.45 77 260
i-propanol(异丙醇)  4.3 2.37 82 210
Chloroform(氯仿)  4.4 0.57 61 245
Methyl ethyl ketone(甲基乙基酮)  4.5 0.43 80 330
Dioxane(二恶烷; 二氧六环; 二氧杂环己烷)    4.8 1.54 102 220
Pyridine(吡啶)  5.3 0.97 115 305
Acetone(丙酮)  5.4 0.32 57 330
Nitromethane(硝基甲烷)  6 0.67 101 330
Acetic acid(乙酸)  6.2 1.28 118 230
Acetonitrile(乙腈)  6.2 0.37 82 210
Aniline(苯胺)  6.3 4.4 184 -
Dimethyl formamide(二甲基甲酰胺)  6.4 0.92 153 270
Methanol(甲醇)  6.6 0.6 65 210
Ethylene glycol(乙二醇 )  6.9 19.9 197 210
Dimethyl sulfoxide(二甲亚砜 DMSO)  7.2 2.24 189 268
Water（水） 10.2 1 100 268

第一个问题：为什么对溶剂有这个要求？并且在不同的波段有不同的要求？既然有溶剂空白，甚或试剂空白、试样空白，即使有吸收也不是扣除了吗？

是呀，那你的空白是一个黑的铁片也能扣除了？

下面是spain给的文献的摘录：

在测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置 1cm 石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸光度。溶剂和吸收池的吸光度，在 220～240nm范围内不得超过 0.40，在 241～250nm范围内不得超过 0.20，在 251～300nm范围内不得超过 0.10，在 300nm以上时不得超过0.05。

而根据玉虎的Chloroform(氯仿)的吸收波长是245nm,你的测试波长好象是242nm,所以用氯仿做溶剂显然是不合适的。

你的第二个问题，由于是以氯仿为空白，根据你的图1，吸光度>3.0了，所以很可能超出了仪器的线性范围，这样图2是无意义的，我认为。

auto1235的例子倒是很犀利。

原文由 auto1235(auto1235) 发表:
第一个问题：为什么对溶剂有这个要求？并且在不同的波段有不同的要求？既然有溶剂空白，甚或试剂空白、试样空白，即使有吸收也不是扣除了吗？

是呀，那你的空白是一个黑的铁片也能扣除了？

我理解为：控制溶剂的系数度不能太大，如果超过一定限度了，那就算是扣除了溶剂空白，测定出来的样品吸收度也没有实际意义了。

吸光度太大了，大大的超标了。稀释到1A左右 应该就OK了